人胚肾培养细胞poly(A)~+RNA在兔网织红细胞无细胞系统中的转译

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建立了兔网织红细胞溶胞物(RRL)体外转译系统。此系统对兔珠蛋白mRNA有良好转译活性,合成的肽链完整。用此系统对人胚肾培养细胞poly(A)~+RNA进行转译,以~(14)C-亮氨酸进行掺入,50μl反应混合物的cpm值为1.5~3.6×10~3,对本底的转译倍数为5.1~7.6倍,用竞争性免疫沉淀鉴定转译产物,表明转译产物中含尿激酶。 A rabbit reticulocyte lysate (RRL) in vitro translation system was established. This system has good translation activity for rabbit globin mRNA and the synthetic peptide chain is intact. This system was used to transfect poly (A) ~ + RNA of human embryo kidney cells and incorporate it into ~ (14) C-leucine. The cpm value of 50μl reaction mixture was 1.5 ~ 3.6 × 10 ~ 3, Of the translational fold of 5.1 to 7.6 times the use of competitive immunoprecipitation identification of translation products, indicating that the translation product containing urokinase.
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