【摘 要】
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目的:构建分泌型重组人生长激素 (recombinanthumangrowthhormone,rhGH)工程菌,优化工程菌表达条件。方法:应用T7启动子与ompA3引导序列构建分泌型表达rhGH工程菌,采用多因素
【机 构】
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军事医学科学院生物工程研究所; 军事医学科学院生物工程研究所 北京100850安徽大学生命科学学院; 合肥230039; 北京100850安徽大学生命科学学院;
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目的:构建分泌型重组人生长激素 (recombinanthumangrowthhormone,rhGH)工程菌,优化工程菌表达条件。方法:应用T7启动子与ompA3引导序列构建分泌型表达rhGH工程菌,采用多因素正交优选法初步筛选培养基成分,进而考察葡萄糖对rhGH表达量的影响。在此培养基基础上优化诱导表达条件,分别考察了诱导起始菌密度、诱导温度、诱导剂浓度和诱导表达时间对rhGH表达量的影响。结果与结论:构建了高效分泌型表达rhGH工程菌,在优化培养基中摇瓶培养至D600值约为 9 2, 37℃进行诱导,IPTG浓度 0. 5mmol/L,诱导后继续培养 10~12h,rhGH分泌表达量可达到 140~160mg/L培养液,目的蛋白占周质总蛋白的 30% ~40%。
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