【摘 要】
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为探究小鼠钠碘转运体(Na+/I-symporter,NIS)蛋白的结构、功能及其在乳腺组织的表达特征,本研究扩增小鼠乳腺NIS基因编码区,测序鉴定后采用结构预测软件对NIS蛋白进行生物信
【机 构】
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哈尔滨师范大学生命科学与技术学院,哈尔滨,150025
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为探究小鼠钠碘转运体(Na+/I-symporter,NIS)蛋白的结构、功能及其在乳腺组织的表达特征,本研究扩增小鼠乳腺NIS基因编码区,测序鉴定后采用结构预测软件对NIS蛋白进行生物信息学分析,同时采用Westernblotting、免疫组织化学技术和半定量PCR技术对NIS基因在不同乳腺发育时期的转录和表达水平进行分析.结果 显示,小鼠NIS基因编码区全长1 857 bp,与人NIS的同源性为80.40％,保守性较强.NIS蛋白含有618个氨基酸残基,分子质量约为65.7 ku,分子式为C2996H4701N749O833S32,理论等电点为7.44,半衰期为30 h,消光系数为102 510,不稳定系数为29.31,脂溶系数为105.91,富含疏水性氨基酸,为稳定的疏水蛋白.NIS蛋白二级结构含有α-螺旋(41.42％)、延伸链(18.28％)、β-转角(4.05％)和无规则卷曲(36.25％),三级结构与之相一致.Western blotting结果显示,4个时期均出现特异性杂交带,大小为65.7 ku,与预期结果相符.免疫组织化学结果表明,NIS蛋白在小鼠的青春期、妊娠期到泌乳期的乳腺组织中表达量逐渐增加,在泌乳期达到高峰,存在显著差异(P＜0.05),在退化期逐渐恢复到类似青春期状态;NIS基因mRNA的变化规律与蛋白表达一致.本研究结果为进一步探究NIS蛋白在乳腺发育和泌乳调控中的作用提供了参考依据.
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