【摘 要】
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研究了各种因素对IL-2表达的影响,发现(1)在本工作的条件下,消除IL-2基因3′端的部分非翻译区,能提高IL-2的表达效率;(2)IL-2基因终止密码子与终止信号间的距离对表达有影响,
【出 处】
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中国科学(B辑 化学 生命科学 地学)
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研究了各种因素对IL-2表达的影响,发现(1)在本工作的条件下,消除IL-2基因3′端的部分非翻译区,能提高IL-2的表达效率;(2)IL-2基因终止密码子与终止信号间的距离对表达有影响,增加此距离(D)会大大降低IL-2表达效率;(3)启动子P_L与P_R串联与否对表达效率无关重要,即带P_R cIts857 P_L元件与带clts857 P_R P_L元件对表达IL-2的效率基本一致;(4)目的基因与选择基因的表达方向对表达IL-2的效率也无影响。在此基础上构建了高效表达的质粒(pLY-4),由它产生的IL-2达到菌体总蛋白的30％～40％,表达γ-干扰素时,可达60％～80％。还建立了简易迅速纯化IL-2的方法,分离包涵体后可达80％纯度,以后再用一步分子筛柱层析即可得到95％以上纯品。
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