观察支气管哮喘患者外周血嗜酸粒细胞(EOS)、淋巴细胞和中性粒细胞对地塞米松及孟鲁司特凋亡诱导作用的反应性,并探讨差异的分子机制

18例支气管哮喘患者外周静脉血分离淋巴细胞、EOS和中性粒细胞,体外培养时分别加入地塞米松和孟鲁司特,流式细胞仪检测细胞凋亡率和Fas受体表达率,用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)水平

(1)凋亡率:体外培养时淋巴细胞、EOS和中性粒细胞的自发凋亡率分别为(6.9±0.7)%、(31±11)%、(32±30)%,地塞米松刺激后的凋亡率分别为(17.1±10.8)%、(44±22)%、(35±24)%,孟鲁司特刺激后的凋亡率分别为(22.5±17.6)%、(50±27)% 和(55±22)%,地塞米松和孟普司特组淋巴空白细胞和EOS凋亡率与空白对照组比较,差异有显著性(P<0.01、0.05);而中性粒细胞与EOS比较,差异无显著性(P>0.05).(2)Fas表达率:淋巴细胞、EOS和中性粒细胞的Fas基础表达率分别为(1.50±0.07)%、(2.20±0.10)%和(1.21±0.09)%,地塞米松刺激后分别为(6.58±2.10)%、(7.52±3.20)% 和(3.24±2.34)%,孟鲁司特刺激后分别为(5.06±1.66)%、(7.45±2.63)%、(3.03±2.47)%,地塞米松和孟鲁司特组淋巴细胞、EOS Fas表达率与空白对照组比较,差异有显著性(P<0.01、0.05),两组间Fas表达率比较差异无显著性(P>0.05),两组中性粒细胞与对照组比较,差异无显著性(P>0.05);(3)caspase-3水平:淋巴细胞、EOS和中性粒细胞的细胞内caspase-3水平分别为(3.3±2.9)ng/L、(5±4)ng/L和(4.3±2.6)ng/L,地塞米松刺激后分别为(6.7±3.1)ng/L、(6±3)ng/L和(3.1±1.8)ng/L, 孟鲁司特刺激后分别为(5.2±3.7)ng/L、(8±4)ng/L和(3.1±2.0)ng/L,地塞米松组和孟鲁司特组EOS和淋巴细胞caspase-3水平与空白对照组比较,差异有显著性(P<0.01、0.05),中性粒细胞caspase-3水平与对照组比较差异无显著性(P>0.05),两组间比较差异无显著性(P>0.05);表明地塞米松和孟鲁司特均显著诱导淋巴细胞和EOS Fas受体的表达和细胞凋亡,二者也能诱导两种细胞内caspase-3活性增加.地塞米松不能诱导中性粒细胞凋亡,其Fas表达和caspase-3水平无显著改变.孟鲁司特可显著诱导中性粒细胞凋亡,但对Fas表达和caspase-3水平亦无显著影响.

支气管哮喘患者的中性粒细胞对地塞米松和孟鲁司特凋亡诱导作用的反应性与淋巴细胞和EOS不同,可能与Fas和caspase-3途径的差异有关.