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目的探讨犬膀胱移行上皮细胞体外连续培养和纯化方法，为进一步构建组织工程尿路上皮组织提供实验依据。方法无菌获取幼犬膀胱组织，0．125％胰蛋白酶消化获取单细胞悬液，于上皮细胞无血清培养基中培养。采用0．05％胰蛋白酶和0．02％EDTA消化、纯化细胞，动态观察细胞形态变化和增殖情况，MTT法绘制生长曲线；透射电镜观察细胞超微结构；SABC法对培养的细胞进行免疫组织化学鉴定；并采用流式细胞仪检测不同代次细胞的细胞周期和倍体水平。结果采用酶消化法能从4～6cm^2的膀胱黏膜组织中分离获取（1～5）×1