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目的
开发制备GCET2兔单克隆抗体,研究其在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)诊断中的应用。
方法采用兔单克隆抗体技术制备GCET2兔单克隆抗体;经免疫印迹、免疫组织化学(IHC)、免疫细胞化学和流式细胞术等方法鉴定其特异性;并用IHC法,检测GCET2与其他DLBCL诊断相关标志物(CD10、bcl-6、MUM1、GCET1、FOXP1、Ki-67和CMYC)在81例DLBCL、5例滤泡细胞淋巴瘤和2例Burkitt淋巴瘤临床样本组织中的表达。
结果GCET2(EP316)抗体能特异性识别生发中心B细胞及其来源的肿瘤组织和细胞系(Raji、Daudi和Ramos)中的GCET2蛋白;对81例DLBCL进行检测,GCET2的阳性率达到43.2%(35/81),明显高于其他生发中心标志物的阳性检出率。此外,CMYC高表达DLBCL样本在GCET2阴性表达和阳性表达样本中所占比例分别为15.2%(7/46)和2.8%(1/35)。
结论本研究制备的GCET2(EP316)抗体具有良好的特异性,是一种敏感的生发中心B细胞标记抗体。GCET2与其他分子标志物联用,可能有助于提高对生发中心B细胞型DLBCL的检测敏感性。