【摘 要】
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为了快速、低成本获得高质量的玉米基因组DNA分子标记检测技术,在借鉴其他作物常规DNA分子标记检测的基础上,摸索了一套包括DNA提取及综合利用测序和普通聚丙烯酰胺凝胶电泳
【机 构】
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新疆康地种业科技股份有限公司,琼州学院生物科学与技术学院
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为了快速、低成本获得高质量的玉米基因组DNA分子标记检测技术,在借鉴其他作物常规DNA分子标记检测的基础上,摸索了一套包括DNA提取及综合利用测序和普通聚丙烯酰胺凝胶电泳技术等DNA标记检测高效方法。以玉米为试验材料,提取其基因组DNA,选择不同玉米分子标记,并将标记扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,然后硝酸银染色,最终建立了一种应用于玉米分子标记的DNA提取和PAGE银染检测方法。在玉米DNA提取改良方面,本研究通过当天取玉米幼叶,立即利用电钻低温0~4℃磨样,并减少1次抽提过程,结果显示提取DNA质量较好。在此基础上利用普通聚丙烯酰胺凝胶电泳检测PCR扩增结果,在优化部分参数后,检测效果依然较好;对其较难检测的差异过小的片段,通过改良的测序凝胶电泳检测,检测结果多态明显,且条带易读,灵敏度及分辨率均比普通聚丙烯酰胺凝胶电泳高。通过改良玉米DNA提取方法及综合利用测序和普通聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,建立了一种行之有效、简便快捷的玉米分子标记应用研究技术。
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