PAM14的细胞转染表达和定位

来源 :安徽医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：mailyangli

【摘要】

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目的构建带GFP标签的PAM14表达载体，将其转染至HEK293T细胞检测其表达，转染至COS7细胞观察PAM14蛋白在细胞内的定位。方法以含人PAM14全长cDNA序列的质粒pACT2-PAM14为模板，用PC

【作者】

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张庆慧汪云飞朱恒锐刘晓颖范礼斌

【机构】

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安徽医科大学生物教研室

【出处】

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安徽医科大学学报

【发表日期】

：

2007年6期

【关键词】

：

基因表达转染印迹法蛋白质 gene expression transfection Western blot

【基金项目】

：

安徽医科大学博士科研基金（编号：XJ2005004）（致谢：实验所用荧光显微镜为中国科学技术大学生命科学院史庆华教授实验室所有,特此致谢!）

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目的构建带GFP标签的PAM14表达载体，将其转染至HEK293T细胞检测其表达，转染至COS7细胞观察PAM14蛋白在细胞内的定位。方法以含人PAM14全长cDNA序列的质粒pACT2-PAM14为模板，用PCR方法扩增PAM14全长序列，然后插入带GFP标签的载体pCDGFP中构建表达载体pCDGFP—PAM14，将构建的质粒转染至HEK293T细胞，提取总蛋白，进行Western-blot检测；转染至COS7细胞，在荧光显微镜下观察其细胞定位。结果成功构建了表达载体pCDGFP-PAM14，此表达载

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