枯草杆菌纳豆激酶基因的克隆及其在E.coli BL21(DE3)plysS中的表达

来源 :内蒙古大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:regelus
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用CTAB法从枯草杆菌(纳豆株)中提取基因组DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增获得837 bp的DNA片段,将该基因片断克隆到pMD18-T载体上,筛选重组子,通过限制性内切酶、PCR技术和测序分析确定该重组子所含插入片断为纳豆激酶基因.利用基因重组技术构建了纳豆激酶基因的融合表达载体,转化E.coli BL21(DE3)plysS后经IPTG诱导在大肠杆菌中高效表达,经SDS-PAGE电泳及bandscan软件分析融合蛋白分子量约为33.4 kD,约占菌体总蛋白29.4%.
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