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应用特异性引物从猪血凝性脑脊髓炎病毒（HEV）中扩增出S1蛋白基因，PCR产物纯化后克隆入pGEM-T载体中，得到重组质粒pTS1。用Ec0R I和Not I双酶切pTS1，回收目的基因S1片段将其定向克隆到pPICZαA中，构建重组质粒pPICZαASI。用BstX I酶切pPICZαAS1使其线性化，并电转至感受态毕赤酵母细胞GS115。PCR法鉴定阳性重组子，用1％甲醇诱导表达后，进行SDS-PAGE及Western blot分析。结果显示，在酵母菌培养基上清中检测到相对分子质量为73000的重组蛋