健康人外周静脉血树突状细胞瘤苗诱导系统免疫效应细胞对BxPC-3的抑制与凋亡

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aaa110122
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的

体外观察诱导扩增的健康人或正常人(统称为健康人)外周静脉血树突状细胞(DCs)杂交瘤苗诱导系统免疫效应细胞(SIECs)对原位胰腺癌细胞株(BxPC-3)的抑制与凋亡作用。

方法

以淋巴细胞分离液梯度离心获得健康人外周静脉血单核细胞(PBMCs),贴壁法获取DCs和去DCs的单核细胞(即SIECs),并分别用人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)、BxPC-3肿瘤特异性抗原(BxPC-3TSA)培养DCs和SIECs。5 d后收集DCs并计数,用PEG+10%二甲基亚砜(DMSO)做为融合剂,按10∶1、5∶1、1∶5将BxPC-3TSA致敏的DCs(简称敏DCs)、DCs分别与BxPC-3进行融合,获得敏DCs-BxPC-3、DCs-BxPC-3融合瘤苗。第7天,SIECs分别和敏DCs-BxPC-3、DCs-BxPC-3、敏DCs、DCs以40∶1混合培养1 d,分别收集混合培养细胞,并以混合细胞中的SIECs∶BxPC-3=10∶1的效靶比对BxPC-3进行膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)法凋亡实验和细胞计数试剂盒(CCK-8)法毒性实验。

结果

敏DCs、DCs与BxPC-3融合,以1∶1的比例融合时融合效果最好,融合率为40.0%。CCK-8法实验显示:敏DCs-BxPC-3、DCs-BxPC-3、敏DCs诱导SIECs对BxPC-3抑制率分别为53.1%、45.3%、78.8%,吸光度(A)值Dunnett T3检验显示组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。凋亡实验显示:敏DCs瘤苗、DCs瘤苗、敏DCs、DCs诱导SIECs对BxPC-3的凋亡率分别为24.17%, 11.43%, 85.87%, 29.94%,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。

结论

肿瘤抗原序贯法致敏DCs使其获取抗原时出现叠加效应,从而发挥更好的抗肿瘤结果;早期DCs融合瘤苗在一定程度上可诱导SIECs抑制肿瘤细胞效果。

其他文献
目的探讨转录因子E2F1对脂肪间充质干细胞(ADSCs)增殖、分化的影响及其可能的作用机制。方法选取6~8周龄野生型(WT)和E2F1基因敲除(E2F1-/-)小鼠,分离获取WT和E2F1-/-原代ADSCs,培养至第4代(P4),观察比较两组细胞形态及鉴定细胞表面标志物。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测两组细胞的增殖能力,并经14 d成脂诱导分化后行油红O染色,观察脂滴的形态及数目。Wester
目的探讨间断皮下注射低剂量促红细胞生成素(EPO)对神经元的保护效果、不良反应及其机制。方法将180只成年Wistar雄性大鼠随机等分为对照组(C组,根性撕脱+隔日皮下注射生理盐水1 ml)和促红细胞生成素组(EPO组,根性撕脱伤+隔日皮下注射EPO 1 000 U/kg)。两组分别在手术苏醒后即刻、1、2、4、7、14 d留取脊髓C5-T1段。尼氏体染色法观察神经元状态;原位缺口末端标记法(TU
尿激酶是纤溶酶原的主要激活物之一,是近年来国内外研究的一个热点,根据尿激酶在病理和生理过程中发挥的作用,已将其应用于临床的众多领域,比如:肿瘤治疗、血管再通、组织修复等。其中,尿激酶在神经科领域得到广泛应用,包括溶栓和颅内血肿微创穿刺术作为血肿液化剂使用,本文就尿激酶在中枢神经系统方面的研究进展进行综述。
自体脂肪组织是肌肉转化,修复骨骼肌缺损的理想供体。脂肪源性干细胞、去分化的脂肪细胞以及棕色脂肪细胞在一定条件下均可分化成骨骼肌细胞,脂肪源性干细胞在体移植后可改善肌肉功能。脂肪组织有可能成为理想的治疗骨骼肌缺损的细胞来源。本文对脂肪组织来源细胞的骨骼肌分化潜能进行了综述,旨在为进一步深入研究提供参考。
微小RNA(miRNA、miR)是一类参与基因转录后调控的非编码小分子RNA。在循环系统中miRNA主要是以核酸-蛋白复合物的形式稳定存在的。已有多项研究表明,循环miRNA疾病,具有成为疾病生物标志物的潜力。近年来,miRNA在静脉血栓栓塞症(VTE)疾病发生、发展中的作用也越来越受重视。我们以miRNA生物合成为出发点,总结了miRNA在凝血-抗凝及纤溶系统中作用以及循环miRNA作为VTE诊
期刊
近年来关于微创骨水泥成形术治疗脊柱转移瘤的研究取得了长足的进展,特别是Sky、Jack、Spine Jack、Osseofix、Kiva、Vessel-X等新型后凸成型器的发明应用,明显降低了脊柱转移瘤患者术中骨水泥的渗漏及其他并发症的发生率,同时也拓展了骨水泥成形术的应用范围。我们主要就近年来与脊柱转移瘤相关的微创骨水泥成形术进行简要综述。
目的观察长链非编码RNA(lncRNA)SUMO1P3在胃癌组织中的表达水平及其对胃癌细胞增殖及凋亡的影响。方法采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测SUMO1P3在63例胃癌及癌旁组织和胃癌细胞株(MGC803、AGS、BSG823、SGC7901)及正常人胃黏膜上皮细胞株(GES-1)中的相对表达量。将胃癌细胞株MGC803分为两组,小干扰RNA组(si-SUMO1P3组)和
目的探讨神经端侧吻合对神经源性膀胱大鼠膀胱功能恢复的作用。方法40只健康成年雄性SD大鼠,体重240~280 g,按随机数字表法分为神经端侧吻合组(ETS,n=15),未吻合组(NC,n=15)和空白对照组(BC,n=10)。ETS组大鼠先离断左侧腰6(L6)和骶1(S1)脊神经前后根,然后将左侧L6前根端侧吻合到左侧L4前根;NC组大鼠只离断左侧L6和S1脊神经前后根,不进行神经吻合;BC组大鼠
期刊