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利用RT—PCR技术将传染性支气管炎病毒M41株的N基因克隆至原核表达载体pET-28a，构建了重组表达载体pET-NP。将其转化大肠杆菌BL21，经IPTG诱导后，NP基因获得高效表达。经SDS-PAGE与Westernblot—ting检测证实表达的NP蛋白具有免疫学活性，且以可溶性蛋白形式存在。以此抗原建立了检测传染性支气管炎病毒抗体的酶联免疫吸附试验（NPELISA）方法。敏感性测定证实，当阳性血清1：500倍稀释时，D450值为0．356，说明仍能检测到IB抗体，该方法比较敏感。特异性试验显示该