【摘 要】
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目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在体外定向诱导人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)向神经细胞分化的作用和条件。方法取足月妊娠剖宫产健康胎儿的脐带,应用酶消化法分离hUCMSCs,传代培养并采用流式细胞术检测细胞表型,包括CD73、CD90和CD105、CD19、CD34、CD45、CD11和组织相容性抗原人类白细胞抗原DR基因(HLA-DR)[人类主要组织相容性复合体(MHC-Ⅱ)],以
【机 构】
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050000 石家庄,河北医科大学第二医院神经外科;050011 石家庄,河北医科大学第四医院药品科,050000 石家庄,河北医科大学第二医院神经外科,050000 石家庄,河北医科大学第二医院神经
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目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在体外定向诱导人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)向神经细胞分化的作用和条件。
方法取足月妊娠剖宫产健康胎儿的脐带,应用酶消化法分离hUCMSCs,传代培养并采用流式细胞术检测细胞表型,包括CD73、CD90和CD105、CD19、CD34、CD45、CD11和组织相容性抗原人类白细胞抗原DR基因(HLA-DR)[人类主要组织相容性复合体(MHC-Ⅱ)],以抗鼠IgG1-藻红蛋白(PE)和IgG1-异硫氰酸荧光素(FITC)作为同型对照。分别以浓度为25、50、100 ng/ml的IGF-1的无血清低糖杜尔伯科改良伊格尔(DMEM)/F12培养基进行体外诱导,加入诱导液后,每2 h在高倍显微镜视野(100倍)下进行动态观察细胞生长、分化情况,随机选取10个视野,拍照并计数典型神经样细胞形态,诱导后8 h用免疫细胞化学技术检测星形胶质细胞标志胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元标志性烯醇化酶(NSE)和神经干细胞标志巢蛋白(Nestin),拍照记录计数阳性细胞。
结果流式细胞检测P3、P5和P10代hUCMSCs,结果显示各代均表达CD73、CD90和CD105,而不表达CD34、CD45、CD19、CD11b和HLA-DR。不同浓度IGF-1诱导后8 h进行免疫细胞化学染色显示,50 ng/ml组的阳性率最高,GFAP、NSE和Nestin的阳性表达率分别为(65.2±2.3)%、(18.2±1.6)%和(21.3±3.5)%。
结论IGF-1在体外可诱导hUCMSCs分化成神经样细胞,并表达GFAP、NSE和Nestin。
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