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目的
评价异丙酚对人肝细胞氧糖剥夺-复氧复糖时自噬的影响。
方法HL-7702细胞培养至对数生长期后,接种于培养板中,采用随机数字表法分为3组(n=12):对照组(C组)、氧糖剥夺-复氧复糖组(OGD/R组)和异丙酚+氧糖剥夺-复氧复糖组(P+OGD/R组)。C组正常培养;OGD/R组和P+OGD/R组氧糖剥夺6 h,复氧复糖12 h制备氧糖剥夺-复氧复糖损伤模型;P+OGD/R组于缺氧缺糖前10 min加入终浓度50 μmol/L的异丙酚。采用MTT法检测细胞活力;采用Western blot法测定自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)和Beclin-1的表达水平;采用免疫荧光法观察自噬小体的数量及分布情况。
结果与C组比较,OGD/R组和P+OGD/R组肝细胞活力降低,LC3和Beclin-1的表达上调(P<0.05),自噬小体数量增加;与OGD/R组比较,P+OGD/R组肝细胞活力升高,LC3和Beclin-1的表达下调(P<0.05),自噬小体数量减少。
结论异丙酚减轻人肝细胞氧糖剥夺-复氧复糖损伤的机制可能与抑制自噬有关。