睡美人转座子在草鱼CIK细胞中介导的高效基因整合

来源 :水生生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：nanometer

【摘要】

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为研究睡美人(SleepingBeauty,SB)转座子系统在草鱼(Ctenopharyngodonidellus)肾脏细胞(CIK)中介导的整合特性,构建了SB转座子和转座酶在两个质粒的二元反式(trans)转座子系

【作者】

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陈凯薛亭王艺舟潘启华于淼陈天圣

【机构】

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华中农业大学水产学院,河南师范大学水产学院

【出处】

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水生生物学报

【发表日期】

：

2018年2期

【关键词】

：

睡美人转座子转座酶草鱼肾脏细胞整合位点 Sleeping Beauty transposon Transposase CIK cells Integ

【基金项目】

：

国家重点基础研究计划 (2013CB967700), 国家自然科学基金(31672653和31771648), 华中农业大学自主科技创新基金(2013RC014和2662015PY049)资助

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为研究睡美人(SleepingBeauty,SB)转座子系统在草鱼(Ctenopharyngodonidellus)肾脏细胞(CIK)中介导的整合特性,构建了SB转座子和转座酶在两个质粒的二元反式(trans)转座子系统,以及转座子和转座酶元件在同一个质粒的一元顺式(cis)转座子系统;通过转染CIK细胞,用荧光显微镜、流式细胞仪和荧光定量PCR分析了转染2d后及嘌呤霉素筛选4周后的细胞,测定DsRed转染效率和整合效率,并结合高效热不对称交互式PCR扩增获得SB转座子整合位点的序列。结果表明,SB二元转

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