【摘 要】
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目的建立TaqMan探针实时荧光定量PCR方法（QF-PCR）,快速检测土拉弗朗西斯菌。方法针对土拉弗朗西斯菌的外膜蛋白fopA基因,利用Primer 5.0设计引物及TaqMan探针,人工合成fopA基因
【机 构】
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南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学系
【基金项目】
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广东省社会发展领域科技计划项目（2010B031000005）, 广州市科技亚运专项（2010U1-E00591）
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目的建立TaqMan探针实时荧光定量PCR方法（QF-PCR）,快速检测土拉弗朗西斯菌。方法针对土拉弗朗西斯菌的外膜蛋白fopA基因,利用Primer 5.0设计引物及TaqMan探针,人工合成fopA基因保守片段,克隆到载体作为阳性标准品,进行荧光定量检测,制作定量标准曲线,并以合成fopA基因为模板,PF、PR为引物,研究其灵敏度、特异性和准确性。结果构建了含fopA基因的重组质粒,以不同浓度的重组质粒制作标准曲线,在103～107拷贝数之间有较好的线性关系。灵敏度试验表明,该方法可检测到30.6个拷
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