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目的 建立完善的肝细胞培养系统,研究逆转录病毒载体转移并表达于大鼠原代肝细胞。方法 采用表皮生长因子(EGF)刺激大鼠原代肝细胞增殖,以表达β-半乳糖苷酶的双顺反子逆转录病毒载体(pGCEN/β-gal)感染肝细胞。X-gal原位染色方法检测肝细胞内LacZ的表达,采用PCR方法扩增NeoR基因,从DNA水平证实逆转录病毒载体整合入肝细胞。结果 EGF在体外可刺激肝细胞增殖并维持肝细胞功能,肝细胞