【摘 要】
：
目的采用3种不同的方法将质粒pEGFP-N1转染人成纤维细胞,从中寻找最佳的稳定转染的方法。方法分别采用阳离子聚合物转染、阳离子脂质体转染和电转染方法,将能表达G418抗性蛋
【机 构】
：
四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室,四川大学华西药学院药理系
论文部分内容阅读
目的采用3种不同的方法将质粒pEGFP-N1转染人成纤维细胞,从中寻找最佳的稳定转染的方法。方法分别采用阳离子聚合物转染、阳离子脂质体转染和电转染方法,将能表达G418抗性蛋白和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒pEGFP-N1转染人成纤维细胞。24h后,荧光显微镜下观察EGFP表达,流式细胞术测定瞬时转染率;通过G418筛选得到稳定转染的细胞。结果电转染有最高的瞬时转染效率(56.8%),稳定转染得到的阳性克隆最多,且从细胞筛选到扩增至得到阳性大克隆所用的时间也最少(约20d);用阳离子聚合物瞬时转染率低(1.7%),稳定筛选同样可以得到阳性大克隆,但是数量很少且从细胞筛选到扩增至阳性大克隆所用的时间也最多(约30d);阳离子脂质体转染效果居中,瞬时转染率为39.9%,从细胞筛选到扩增至得到阳性大克隆所用的时间约25d。结论用电转染法将质粒pEGFP-N1转染人成纤维细胞是最佳的转染方法。
其他文献
<正>在临床护理工作中,静脉穿刺一般首选手足背静脉进行操作。手足背静脉网是浅静脉的一部分,有很好的网状结构,与深静脉相通,可回流心脏。在临床患者中,有相当一部分人的手
根据现场的实际施工需要,针对油水井储层损害评价方法和增产增注措施优化施工设计与经济效果预测方法进行了研究。依据渗流力学理论和采油工艺理论,分别对五类储层建立了油井
腈纶厂回收装置主要腐蚀介质NaSCN(硫氰酸钠)腐蚀性极强,它不仅对碳钢,铝和铝合金有腐蚀性,而且对一般的不锈钢也有一定的腐蚀性,虽然大部分设备采用超低碳不锈钢00Cr17Ni14M
目的总结肾移植术后急性排斥反应的主要临床症状和表现,并提出相应的护理措施,以指导临床护理工作。方法回顾性统计36例肾移植术后患者发生排斥反应时的临床症状和表现,并进
目的考察在光照、加热条件下甲醇溶液中大叶茜草素的稳定性。方法以甲醇-水-四氢呋喃(310:90:3)为流动相,利用DiscoveryC18色谱柱在250nm处测定大叶茜草素的含量,考察在4500
介绍国内开发的第三代催化裂化干气制乙苯技术在中国石油天然气股份有限公司锦西石化分公司的工业应用情况。该技术反应部分采用气相烷基化与液相烷基转移相结合的反应工艺,
数据挖掘是近年来随着数据库技术和人工智能技术的发展而出现的一种全新的信息技术,是指从数据中提取模式的过程。同时,数据挖掘又是一种决策支持过程,它主要基于人工智能、
目的比较电子血压计和汞柱式血压计测量血压值的差异。方法选择87例患者于8:00和16:00交替应用汞柱式血压计(台式)和欧姆龙电子血压计测量血压,比较两种血压计血压测量值的差
公平价格是中世纪教会重要的经济伦理之一。从早期罗马法文本到13世纪的各类哲学和神学著作中,法学家和神学家出于神学正义论和对商人的担忧,都对公平价格概念和理论进行过详
目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)、血小板源性生长因子(PDGF)、结缔组织生长因子(CTGF)在尘肺病发生、发展中表达水平的变化及其意义。方法采用双抗体夹心法,测定70例尘肺