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Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂(SPI)在机体的发育、免疫等生理过程中发挥重要的作用.从家蚕蛹cDNA文库中获得一条全长为728 bp的基因序列,对该基因编码的氨基酸序列进行同源性比对,发现其蛋白具有保守的Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂结构域(CⅠ-X3-CⅡ-X8-CⅢ-X14-CⅣ-X6-CⅤ-X13-CⅥ),且P1活性位点为赖氨酸(K),因此将该基因命名为BmSPI3(GenBank登录号:DN237641).通过PCR扩增BmSPI3基因,经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后成功构建了重组表达质粒pGEX-4T-1-BmSPI3,并转化到E.coli BL21(DE3)表达,经SDS-PAGE电泳检测在约36 kD处有明显的蛋白表达条带.提取各发育时期蚕体和5龄幼虫各个组织的总RNA中荧光定量PCR,检测结果表明:BmSPI3在5龄幼虫期表达量最高,卵期最低;在5龄幼虫表皮中的表达量最高,在马氏管的表达量最低.推测BmSPI3对胰蛋白酶和类胰蛋白酶具有抑制作用.