目的比较酶联免疫斑点法(ELISPOT)和Cultured ELISPOT检测宫颈癌HPV16全基因组抗原多肽特异性CTL反应水平差异。方法选择2015年9月-2017年3月新疆医科大学附属肿瘤医院病理明确诊断宫颈鳞状细胞癌32例患者,采用ELISPOT试验(19例,ELISPOT组)和Cultured ELISPOT试验(13例,Cultured ELISPOT组),比较2组HPV16抗原多肽特异性CTL反应频率及强度差异。观察HPV16全基因组抗原多肽E1-1、E1-2、E2、E4、E5、E6、E7、L1及L2刺激后的免疫反应。结果 Cultured ELISPOT组各孔HPV16抗原多肽E1-1、E1-2、E2、E4、E5、E6、E7、L1及L2斑点数高于ELISPOT组。ELISPOT组与Cultured ELISPOT组各肽段间特异性CTL反应频率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Cultured ELISPOT组特异性CTL细胞数显著高于ELISPOT组,2组E1-1、E1-2、E2、E4、E6、E7、L1及L2肽段特异性CTL反应强度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。从反应频率及强度观察,L1肽段略高于其他肽段。结论 Cultured ELISPOT检测法与ELISPOT相比有较高的灵敏性,该方法可用于特异性优势肽段筛选。