纳豆激酶检测体系的建立及其跨膜转运途径初探

来源 :成都医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：walger

【摘要】

：

目的建立纳豆激酶（nattokinase,NK）酶联检测体系,探讨其跨膜转运机制。方法采用杂交瘤技术筛选抗NK的单克隆抗体,竞争抑制法鉴定单抗识别的抗原表位,Western Blot测定单抗特异

【作者】

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李敏惠陈瑜蒋玉亮李艳余赟毛明星林定彪杨亚琼杨

【机构】

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成都医学院科研实验中心,成都医学院生物医学系,成都医学院基础医学院

【出处】

：

成都医学院学报

【发表日期】

：

2016年5期

【关键词】

：

纳豆激酶单克隆抗体跨膜转运蛋白转导结构域 Nattokinase Monoclonal antibodies Transmembrane transpor

【基金项目】

：

四川省教育厅项目（No：13ZB0220）, 四川省科技厅项目（No：2015JY0205）, 四川省卫生厅项目（No：130302,130298）, 成都医学院科研基金（No：CYZ11-005）, 国家级大学生创新项目（No：201313705007,201313705003,201413705005）

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目的建立纳豆激酶（nattokinase,NK）酶联检测体系,探讨其跨膜转运机制。方法采用杂交瘤技术筛选抗NK的单克隆抗体,竞争抑制法鉴定单抗识别的抗原表位,Western Blot测定单抗特异性,双抗夹心ELISA法进行单抗灵敏度测定,Caco-2细胞模型探讨NK跨膜转运机制,生物信息学预测NK穿膜相关序列。结果筛选得到稳定分泌抗体且特异性识别NK的杂交瘤细胞6株,其中3株单抗识别相近的抗原表位,其余单抗识别不同的抗原表位;6株单抗检测NK的最小灵敏度分布为0.78~20.00ng/mL;Caco-2细

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