【摘 要】
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为探究和挖掘更多杀虫剂靶标受体,采用PCR方法结合RACE技术克隆了棉铃虫烟碱类乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)的α7亚基(nAChR-α7)基因,通过荧光定量PCR技术进行时空表达分析,并采用电生理检测以及RNAi技术研究该基因对棉铃虫生长发育的调控作用.结果 表明,棉铃虫nAChR-α7基因(GenBank登录号:KM884875)全长3632 bp,包含编码496个氨基酸的1491 bp开放阅读框.该基因具有nAChR典型结构,与其他鳞翅目
【机 构】
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中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100193;河南农业大学植物保护学院,郑州450002;中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京10019
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为探究和挖掘更多杀虫剂靶标受体,采用PCR方法结合RACE技术克隆了棉铃虫烟碱类乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)的α7亚基(nAChR-α7)基因,通过荧光定量PCR技术进行时空表达分析,并采用电生理检测以及RNAi技术研究该基因对棉铃虫生长发育的调控作用.结果 表明,棉铃虫nAChR-α7基因(GenBank登录号:KM884875)全长3632 bp,包含编码496个氨基酸的1491 bp开放阅读框.该基因具有nAChR典型结构,与其他鳞翅目昆虫nAChR-α7基因同源性较高,且包括胞外N端配体结合区、半胱氨酸环、Loop A～Loop F、跨膜区(TM1～TM4)和1个短的C端胞外尾.nAChR-α7基因在棉铃虫幼虫头部及成虫期高表达;通过将nAChR-α7基因在非洲爪蟾Xenopus oocytes卵母细胞中表达,并检测电生理信号,确定该基因是nAChR受体基因,但不能持续响应ACh信号.干扰试验结果显示nAChR-α7基因对棉铃虫幼虫生长发育无显著影响.推测该基因可能不是主要的nAChR基因,而是与其他亚基基因共同起作用.
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