【摘 要】
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目的 探讨RASSF6基因对胃癌细胞增殖、自噬、凋亡及对奥沙利铂化疗敏感性的影响.方法 体外培养胃癌BGC823细胞,依据慢病毒基因表达分为正常对照组(control组)、RASSF6过表达组(Oe组)、RASSF6干扰组及慢病毒对照组.分别检测各组细胞增殖、细胞周期分布、细胞迁移、自噬、凋亡变化及对奥沙利铂化疗的敏感性,电镜观察各组细胞自噬小体数,荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blotting)检测各组细胞凋亡和自噬相关基因的表达.结果 RASSF6基因表达对胃癌BGC
【机 构】
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宁夏医科大学总医院肿瘤医院肿瘤内科,宁夏银川 750004;宁夏医科大学临床医学院,宁夏银川 750004;宁夏回族自治区人民医院肿瘤科,宁夏银川 750004
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目的 探讨RASSF6基因对胃癌细胞增殖、自噬、凋亡及对奥沙利铂化疗敏感性的影响.方法 体外培养胃癌BGC823细胞,依据慢病毒基因表达分为正常对照组(control组)、RASSF6过表达组(Oe组)、RASSF6干扰组及慢病毒对照组.分别检测各组细胞增殖、细胞周期分布、细胞迁移、自噬、凋亡变化及对奥沙利铂化疗的敏感性,电镜观察各组细胞自噬小体数,荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blotting)检测各组细胞凋亡和自噬相关基因的表达.结果 RASSF6基因表达对胃癌BGC823细胞生物学行为的影响,与control组相比,Oe组细胞G0/G1期细胞百分比升高,G2期、S期细胞百分比降低,差异有统计学意义(P<0.05);细胞凋亡率明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);细胞划痕面积划痕愈合率显著下降,差异均具有统计学意义(P<0.05).RASSF6基因表达对奥沙利铂药物敏感性的影响,与药物组(L-OHP组)相比,Oe+L-OHP组细胞凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05);Western blotting检测示Oe+L-OHP组细胞抗凋亡蛋白Bcl-2表达下降,促凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达升高,细胞自噬小体增多,自噬相关蛋白Beclin-1、P62表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高(P<0.05).结论 RASSF6过表达可抑制胃癌细胞增殖,促进细胞自噬和凋亡并提高胃癌细胞对奥沙利铂化疗敏感性.RASSF6基因可作为胃癌治疗新的靶点.
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