橡胶树HbMVK启动子的克隆与缺失表达分析

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为了研究橡胶MVK基因启动子精细结构及功能,笔者利用PCR技术对橡胶树HbMVK基因启动子进行了克隆,并对其进行了生物信息学分析.结果表明,该启动子序列全长1 696 bp,包含CAAT-box,TATA-box,CAT-box,LTR,GARE-motif,TCA-element等元件.此外,根据元件分布,构建橡胶树HbMVK基因启动子系列缺失和全长序列表达载体并转化拟南芥.T2代转基因拟南芥中,报告基因GUS组织化学染色结果表明:HbMVK启动子全长序列和5端-1 386 bp缺失,HbMVK启动子驱动的GUS基因只在转基因拟南芥实生苗胚轴中有极微弱表达.5端-1 221 bp和-725 bp缺失,HbMVK启动子驱动GUS基因表达的活性较强,而5端-325bp缺失,HbMVK启动子则完全失去活性,这表明启动子核心调控元件位于-725 bp到-325 bp之间.
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