【摘 要】
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目的 构建纤维连接蛋白羧基端细胞结合域(FnCBD64)基因重组人腺病毒载体(Ad.FnCBD64).方法 (1)FnCBD64重组腺病毒粘粒载体的构建;(2)293细胞和Hela细胞的培养;(3)磷酸钙转染;
【机 构】
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包头市九原区医院胸外科,内蒙古包头,014060
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目的 构建纤维连接蛋白羧基端细胞结合域(FnCBD64)基因重组人腺病毒载体(Ad.FnCBD64).方法 (1)FnCBD64重组腺病毒粘粒载体的构建;(2)293细胞和Hela细胞的培养;(3)磷酸钙转染;(4)FnCBD64基因重组腺病毒筛选和扩增;(5)设计腺病毒粘粒载体pAxCAwt公共PCR引物;(6)鉴定Ad.FnCBD64重组腺病毒;(7)浓缩与纯化重组腺病毒;(8)体外安全性研究.结果 成功构建了纤维连接蛋白羧基端细胞结合域(FnCBD64)基因重组腺病毒载体Ad.FnCBD64,病毒滴度较高且安全性亦高.结论 本实验成功构建了携带人FnCBD64基因的重组腺病毒,为应用FnCBD64促进骨髓间质干细胞黏附力提供了转染的载体,其使骨髓间质干细胞更快、更好地在体外构建组织工程心脏瓣膜成为可能.
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