【摘 要】
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目的探讨miR-125在鼻咽癌组织中的表达及其调控肿瘤细胞生物学特性的可能机制。方法收集2018年6月至2019年6月上海交通大学附属第六人民医院南院收治的鼻咽癌患者癌组织及癌旁组织各30例，通过荧光定量PCR法检测miR-125和成纤维细胞生长因子2(FGF-2)mRNA的表达。鼻咽癌细胞CNE-2转染miR-125 mimic(miR-125 mimic组)，并设阴性对照组(NC组)。Tran
【机 构】
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上海交通大学附属第六人民医院南院耳鼻喉科 201400；上海交通大学附属第六人民医院南院中心实验室 201400,上海交通大学附属第六人民医院南院耳鼻喉科 201400,上海交通大学附属第六人民医院南
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目的探讨miR-125在鼻咽癌组织中的表达及其调控肿瘤细胞生物学特性的可能机制。
方法收集2018年6月至2019年6月上海交通大学附属第六人民医院南院收治的鼻咽癌患者癌组织及癌旁组织各30例，通过荧光定量PCR法检测miR-125和成纤维细胞生长因子2(FGF-2)mRNA的表达。鼻咽癌细胞CNE-2转染miR-125 mimic(miR-125 mimic组)，并设阴性对照组(NC组)。Transwell小室实验检测细胞侵袭能力；划痕愈合实验检测细胞迁移能力；WST-1用于评估细胞的增殖活力；流式细胞术和电镜观察分别用于检测细胞的凋亡和自噬；双荧光素酶报告分析miR-125靶标；Western blotting检测相关蛋白的表达情况。
结果鼻咽癌组织中miR-125 mRNA的相对表达量为0.692±0.316，明显低于癌旁组织的1.501±0.748(t＝5.242，P<0.001)；鼻咽癌组织中FGF-2 mRNA的相对表达量为1.317±0.552，明显高于癌旁组织的0.783±0.241(t＝7.360，P<0.001)。miR-125 mimic组CNE-2细胞中miR-125 mRNA的表达量为4.091±0.145，显著高于NC组的0.993±0.137(t＝85.062，P<0.001)。miR-125 mimic组完成转染48、96 h后，CNE-2细胞的增殖活性均显著低于NC组(0.891±0.214 vs. 1.295±0.245，t＝6.802，P<0.001；0.934±0.208 vs. 1.488±0.269，t＝8.924，P<0.001)。miR-125 mimic组的穿膜细胞数和细胞的迁移率分别为(36 000±3 820)个和(39.4±6.5)%，均显著低于NC组的(74 000±7 500)个和(102.7±10.6)%(t＝24.728，P<0.001；t＝27.883，P<0.001)。miR-125 mimic组CNE-2细胞凋亡率为(22.5±1.4)%，显著高于NC组的(1.4±0.5)%(t＝77.740，P<0.001)，且miR-125 mimic组细胞凋亡蛋白Bax的相对表达量为0.983±0.158，显著高于NC组的0.418±0.122(t＝15.503，P<0.001)，Bcl-2的相对表达量为0.688±0.174，显著低于NC组的1.013±0.109(t＝8.670，P<0.001)。电镜观察到miR-125过表达的CNE-2细胞出现自噬现象，miR-125 mimic组自噬蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ相对表达量比值为2.517±0.209，显著高于NC组的1.238±0.135(t＝28.156，P<0.001)。miR-125 mimic组FGF-2蛋白的表达量为0.504±0.118，显著低于NC组的1.228±0.134(t＝22.210，P<0.001)。双荧光素酶报告证实FGF-2是miR-125的靶基因。FGF-2基因质粒和miR-125 mimic共转染的CNE-2细胞完成转染12、24、48及96 h细胞增殖活性均显著高于miR-125 mimic转染细胞(均P<0.05)，细胞凋亡率显著低于miR-125 mimic转染细胞[(6.2±1.5)% vs. (17.6±2.4)%，t＝22.062，P<0.001]。
结论miR-125在鼻咽癌组织中表达下降，过表达miR-125可能通过下调FGF-2抑制鼻咽癌细胞CNE-2的增殖、迁移和侵袭，促进CNE-2的凋亡与自噬。
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