【摘 要】
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目的:检测MTH1在多发性骨髓瘤(MM)患者CD138阴性细胞(CD138-)及CD138阳性细胞(CD138+)中的表达,探讨MTH1抑制剂对MM细胞株U266细胞的形态、增殖和凋亡等细胞生物学特性的影响
【机 构】
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青岛大学附属医院血液科,山东青岛 266000青岛大学附属医院分子诊断与再生医学实验室,山东青岛 266000;军事科学院军事医学研究院放射医学研究所,北京 100850;吉林大学护理学院,吉林长春
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目的:检测MTH1在多发性骨髓瘤(MM)患者CD138阴性细胞(CD138-)及CD138阳性细胞(CD138+)中的表达,探讨MTH1抑制剂对MM细胞株U266细胞的形态、增殖和凋亡等细胞生物学特性的影响.方法:分离MM患者CD138-及CD138+并提取RNA,应用Q-PCR分别检测NUDT家族的表达情况.利用MM细胞系U266观察白细胞介素-6(IL-6)对MTH1表达变化的影响.在荧光显微镜下观察TH588作用于U266细胞48 h后的形态变化,用DAPI染色法观察细胞核的变化.应用荧光素酶活性检测TH588对U266细胞增殖的影响,应用流式细胞术检测TH588对U266细胞凋亡的影响.结果:MM患者CD138+中MTH1、NUDT2、NUDT5及NUDT21表达较CD138-高(P<0.05).荧光素酶报告显示TH588处理U266细胞后,与对照组相比,荧光强度值明显降低,且药物浓度越大,荧光强度值越低(r=-0.91);应用IL-6能使MTH1表达水平增高,荧光显微镜下观察,TH588处理U266细胞48 h后,细胞出现皱缩、变小以及形状不规则等表现,DAPI染色后,TH588处理过的细胞呈现细胞核缩小、染色不均、花瓣状和放射状等凋亡特征;流式细胞术分析结果显示,TH588处理U266细胞48 h后,存活细胞比例明显降低(P<0.05).结论:MTH1在部分MM患者的CD138+中高表达,U266细胞在IL-6的作用下可见MTH1表达增高,MTH1抑制剂TH588对MM U266细胞株具有明显地抑制增殖和诱导细胞凋亡的作用.
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