【摘 要】
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本实验构建了在大肠杆菌中能表达玉米叶绿体ＣＦ１完整β亚基、缺失Ｎ端２３个氨基酸残基的β亚基以及完整ε亚基的表达质粒。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ实验表明，在分别含这些表达质粒的细菌中β、ε亚基蛋白的合成量在诱导３ｈ后即达到饱和，其含量各占细菌体总蛋白的１０％左右。这些表达产物在细菌体中形成不溶性的包含体。可通过对菌体蛋白的分级分高，将表达产物溶于５ｍｏｌ／Ｌ的尿素溶液中。
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本实验构建了在大肠杆菌中能表达玉米叶绿体ＣＦ１完整β亚基、缺失Ｎ端２３个氨基酸残基的β亚基以及完整ε亚基的表达质粒。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ实验表明，在分别含这些表达质粒的细菌中β、ε亚基蛋白的合成量在诱导３ｈ后即达到饱和，其含量各占细菌体总蛋白的１０％左右。这些表达产物在细菌体中形成不溶性的包含体。可通过对菌体蛋白的分级分高，将表达产物溶于５ｍｏｌ／Ｌ的尿素溶液中。
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在无盐条件下，外源乙烯对苜蓿种子萌发有促进作用，但对最终发芽率无影响。盐渍严重抑制苜蓿种子萌发，加入１～５０μｌ／Ｌ（ｖ／ｖ）外源乙烯或０．１～５．０ｍｍｏｌ／Ｌ１－氨基环丙烷－１－羧酸（ＡＣＣ）或５～１００ｍｇ／Ｌ（ｗ／ｖ）乙烯利（ＥＴＨ）均能极显著地减轻ＮａＣｌ对苜蓿种子萌发的抑制作用。激动素（ＫＴ）也有类似作用，并能促进萌发种子的乙烯产生，它与ＡＣＣ一起使用，则对种子萌发和乙烯产生均显示加成
菠菜离体完整叶绿体需要合适的介质渗透压（约０．９ＭＰａ）以保持其较高的光合作用速率。当渗透压因降低介质中山梨醇浓度（从０．３３ｍｏｌ／Ｌ至０．１７ｍｏｌ／Ｌ）而降低时，叶绿体的完整率保持不变。低于临界渗透压（约０．５ＭＰａ），叶绿体被膜就发生破裂．并丧失ＣＯ２同化能力。在轻度低渗条件下，虽然叶绿体被膜未破，但依赖ＣＯ２的放氧速率已受抑制。渗透压在０．９ＭＰａ与０．５ＭＰａ之间，叶绿体依赖ＰＧＡ的放
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构建的重组质粒ＰＢＦ１０１带有阴沟肠杆菌（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｃｌｏａｃａｅ）Ｅ２６固氮基因ｎｉｆＡ片段，该质粒具有广泛宿主范围接合转移特性和转座子Ｔｎ５的转座作用。验证了Ｅ２６ｎｉｆＡ产物能激活肺炎克氏杆菌（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）ｎｉｆＨ启动子的表达，解除氨对固氮酶合成的阻遏作用。发现当ＰＢＦ１０１引入自生固氮催娩克氏杆菌（Ｋ．ｏｘｙｔｏｃａ）ＮＧ１３后，可观察到固氮酶的
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以ＰＭＮ２作为载体质粒，应用体内克隆技术，从紫云英根瘤菌胞外多糖缺陷型变种ＮＡ－１１中，分离到ｅｘｏＲ′质粒，该杂合质粒带有Ｔｎ５及其插入位点两侧的根瘤菌ＤＮＡ片段。ｅｘｏＲ′质粒能稳定地存在于紫云英根瘤菌中，不仅可纠正紫云英根瘤菌Ｅｘｏ－变种（Ｎｄｖ－）的胞外多糖合成缺陷，也能恢复该变种使宿生植物根部结瘤的能力。
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