【摘 要】
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目的构建重组表达人C-型利尿钠肽（CNP）-人血清白蛋白（HSA）融合蛋白质的毕赤酵母。方法重叠PCR拼接CNP（400bp）-HSA（1800bp）成融合基因，双酶切后克隆至表达载体pPIC9K中。电穿孔法转染毕
【机 构】
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江南大学医药学院分子药理研究室江南大学工业生物技术教育部重点实验室,无锡市第三人民医院
【基金项目】
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国家“863”计划项目（2006AA02Z153）,上海市科委生物医药重大科技攻关项目（06DZ19020）.致谢：感谢无锡市第三人民医院中心实验室孙钧铭主任和刘栋医生,上海复旦大学生命科学院卢大儒教授以及本实验室徐钰硕士、窦文芳博士、吴静博士、花慧博士在本实验设计及进行中给予的帮助.
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目的构建重组表达人C-型利尿钠肽（CNP）-人血清白蛋白（HSA）融合蛋白质的毕赤酵母。方法重叠PCR拼接CNP（400bp）-HSA（1800bp）成融合基因，双酶切后克隆至表达载体pPIC9K中。电穿孔法转染毕赤酵母菌KM71，摇瓶培养分泌表达。结果融合基因约为2200bp，序列测定正确。SDS—PAGE分析相对分子质量约为80000，Western blot和RIA鉴定显示其为CNP与HSA的杂合分子。结论实现了HSA—CNP融合蛋白质在毕赤酵母中的分泌表达。
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