论文部分内容阅读
【摘要】 目的 研究行部分肝切除术后PVA对肝硬化的影响,证实PVA能促进部分肝切除术后肝细胞再生,改善肝硬化。方法 肝硬化模型犬随机分三组,A组肝脏42%切除+门静脉动脉化;B组肝脏42%切除;C组对照组。实验中按计划行多普勒超声检查,血化验研究肝功能变化,检测血管內皮细胞标记抗原CD34。结果 A组肝重显著高于B组(P<0.01);A组肝功能的改善亦加快;血流动力学改变在术后A组高于其余二组;免疫组化检测血管内皮细胞标记抗原CD34计数A组高于其余二组。结论 ①门静脉动脉化有助于部分肝切除术后肝功能的改善;②门静脉动脉化增加肝细胞再生及改善肝硬化。
【关键词】
门静脉动脉化;肝硬化
The effects of portal vein arterialization and party hepatectomy to the hepatocirrhosis
ZHOU Qiang,PENG Yubing.The Eighth people’s Hospital of Shanghai,Shanghai 200235,China
【Abstract】 Objective To investigate the effects of portal vein arterializations(PVA)on hepatocirrhosis after party hepatectomy,proved that the PVA can increase the regeneration after party hepatectomy,and improve the hepatocirrhosis.Methods The cirrhosis model dogs were allocated randomly into three groups,dogs in group A received PVA after 42%liver resection,in group B underwent 42%liver resection only,group C was control group.During the experiment,Before operation,we used the color Doppler senograph to measure the hemodynamic change,the blood was taken to study the alteration of liver function and we use the immunohistochemical technique to exam CD34 of specimens.Results In group A liver weight is significant higher than group B(P<0.01)。The improvement ofliver function was also faster in group A。The blood flew of group A was higher than other two groups in 2 ds(P<0.05).In group A the vascular area defined by endothelial cells that stained for CD34 was higher than two groups.Conclusion ①The portal vein arterializations improve the cirrhosis liver function after partyhepatectomy.②The portal vein arterializations increase the liver regeneration and improve the hepatocirrhosis.
【Key words】
Portal vein arterializations; Hepatocirrhosis
DOI:10.3760/cma.j.issn 16738799.2010.01.12
作者单位:200235上海市第八人民医院
肝硬化是一种或多种因素长期或反复损伤肝脏实质,导致结缔组织弥漫性增生伴有肝细胞结节状再生的慢性过程[1]。目前唯一的根治手段是肝移植。临床对肝硬化的治疗,以各种药物缓解硬化进程,防止并发症为主,外科不同方式的分流和断流手术,只能对症处理门脉高压引起的脾亢、腹水、静脉曲张破裂等并发症。在临床和实验治疗肝功能衰竭和部分肝移植的医疗实践中,使用控制性的门静脉动脉化技术被证实是一种有效改善肝细胞功能的手段。
本课题使用文献2的方法制作犬肝硬化模型,随机分为3组,给予不同的手术处理,验证门静脉动脉化是否能缓解肝硬化程度,促进肝脏再生,从而探讨一种可能的新的治疗肝硬化的外科手段。
1 材料与方法
1.1 动物来源及肝硬化模型制作
健康成年杂种犬24只,雌雄各12只,体重9~10 kg。参考文献3的方法,所有犬每周腹腔内2次注射CCI4(40%)与花生油(60%)混合剂,剂量0.12 ml/kg,共八周,犬饲料含10%猪油,饮用水含10%乙醇。3~4周后所有犬出现肝硬化。制作过程中,2只犬死亡,雌雄各一。
1.2 实验分组及处理 剩余22只犬随机分组:A组9只,B组8只,C组5只。A组肝脏左外侧叶切除+门静脉动脉化;B组肝脏左外侧叶切除;C组假手术组。
1.3 实验手术方法 动静脉吻合方式:使用胃十二指肠与门静脉主干距肝门1 cm处左外侧行端侧吻合。肝脏切除范围:单纯左外侧叶切除,占肝脏总重量42%。
1.4 术后管理 ①手术中A、B各组各有一只犬死亡,雌雄各一;②术后1周A组一只犬死亡(雄性),术后2周B组又有一只犬死亡(雄性);③术后28 d所有犬麻醉开腹,行多普勒超声检查,取全肝称重,部分肝组织甲醛固定。
1.5 实验指标 ①彩色多普勒超声检测:Acsonl 128XP/10电脑超声测量犬的门静脉最大流速、门静脉每分流量;②肝功能指标:TBIL、ALT、ALB;③肝脏再生指标:肝再生率SE=(术后处死时肝重/体重)/(术前肝重/体重);④免疫组化检测血管内皮细胞标记抗原CD34。
1.6 统计学方法 所有表格内统计数据以(x±s)表示,组间差异分析采用方差分析,组间两两比较实用T检验,所有统计学处理均采用Stata6.0软件完成。
2 结果
2.1 多普勒血流动力学指标
2.1.1 门静脉最大流速 硬化造模后的门静脉流速有所下降,A组在动脉化后上升了约3 cm/s,高于B组(P<0.05),仍然低于造模前正常肝门静脉流速。
2.1.2 门静脉每分流量 A组的血流量在术后即可明显上升,高于B组(P<0.05),术后2 d仍高于B、C组,但再后已无统计学意义,说明门静脉动脉化后入肝血流量增加在早期较明显。
2.2 肝功能指标
2.2.1谷丙转氨酶ALT A组ALT在术后初期与B组无明显差异,术后2周A组的ALT值恢复优于B组(P<0.01),术后4周该值低于造模后,提示PVA对肝细胞功能恢复的作用。
2.2.2 血清白蛋白ALB A組的白蛋白合成能力强于B组,其术后1周的统计值优于本组术前,也高于B、C组同期统计值(P<0.05)。
2.2.3血清总胆红素TBIL 术后2 d,A组的TBIL值下降快于B组(P<0.01),但1周后3组TBIL无明显统计学差异,提示该术式肝叶切除不导致明显胆红素的变化
2.2.4肝脏再生指标 评价肝脏再生能力的肝脏再生率SE值(12)=(术后处死时肝重/体重)/(术前肝重/体重),A组(7例)SE:86.6±2.9;B组(6例)SE:7 3.7±6.9,数据表明A组肝再生率高于B组(P<0.01)。
2.2.5 新生血管免疫组化指标CD23
A组(7例)造模后(175.5±31.3)、28 d后(263.9±35.3);B组(6例)造模后(183.0±24.1)、28 d后(208.5±17.8);C组(5例)造模后(184.0±23.1)、28 d后(179.8±16.5);动脉化组的CD23阳性计数多于非动脉组(P<0.05),说明动脉化组促进了内皮细胞的生成。
表1
血流动力学指标分组造模前造模后术后即时术后2 d术后14 d
门静脉最大流速Vmax(cm/s)
A22.2±2.1817.94±1.7020.47±2.3820.27±2.0519.36±1.89
B21.16±2.8917.97±1.9317.47±1.7716.93±1.7916.00±2.09
C20.66±2.3817.76±2.68
门静脉每分流量(ml/min)
A311.6±114.3344.9±80.1444.69±153.82404.2±108.3372.6±112.5
B286.1±101.8353.3±95.2317.10±36.96364.9±79.8343.9±84.3
C292.0±139.4366.5±121.5
表2
指标分组造模前造模后术后2 d术后7 d术后14 d
ALT(U/L)A60.5.6±15.4149.9±35.7322.0±90.5206.5±78.3114.7±42.7
B61.9±15.5129.2±38.3389.4±80.5235.4±64.1176.8±45.0
C53.8±19.7108.8±30.3110.3±28.6102.3±18.596.8±30.1
ALB(g/L)A40.6±10.035.3±10.326.3±6.630.8±7.233.0±7.1
B37.1±7.531.0±7.021.2±3.622.6±3.424.0±3.5
C32.3±6.528.6±5.2326.8±6.228.4±6.029.1±5.4
TBIL(μmol/L)A40.6±10.035.3±10.326.3±6.630.8±7.233.0±7.1
B37.1±7.531.0±7.021.2±3.622.6±3.424.0±3.5
C32.3±6.528.6±5.2326.8±6.228.4±6.029.1±5.4
3 讨论
门静脉动脉化(PVA)是指通过建立动脉与门静脉或其分支之间的通路,以动脉血增加或替代门静脉血灌注肝脏的手术方法。最初是由Cohn[3]1952年根据门腔分流术后肝灌注减少,肝性脑病发生率升高而提出。其最早用于肝硬化端侧门体分流术的患者,该术式可以防止术后肝衰,降低肝性脑病发生率[4,5],其对于改善肝细胞代谢环境的作用是肯定的。
PVA无固定的手术方式,已知的包括肝动脉门静脉,胃十二指肠动脉门静脉,肝总动门静脉,肾动脉门静脉等等。研究证实,动脉化导致门静脉的血流动力学改变必须控制在一定范围以内,才能保证肝脏的正常生理功能[6]。动脉化导致门静脉的血流量超过正常流量的一倍,则导致肝内门静脉分支增宽,内膜纤维变性,以及肝细胞微粒体酶活力的改变,内皮细胞损伤,Disse间隙增宽[7]。由于肝硬化时门静脉压力已经高于正常,该技术的使用关键是对入门静脉血流量进行控制。选择尽量不触动肝门解剖,同时为了控制血流量,使用胃十二指肠动脉与门静脉吻合的术式,术后多普勒表明血流量上升了25%~30%。
本实验中,在已经形成肝硬化,假小叶生成的情况下,使用PVA技术得到了肝脏细胞外基质水平降低,肝功能好转的结果,其原因可能是再生机制的启动和汇管区、Disse间隙血氧供应改善同时作用的结果。正常情况下,肝细胞有两面与血液直接接触,这是细胞完成代谢的生理基础,而且肝细胞从低氧的门静脉血液中摄氧的能力也高于机体其他细胞[8,9]。肝硬化时,肝细胞与血液直接接触面积减少,吸收氧的能力和营养物质大大减少,细胞线粒体代谢呼吸链缺氧而损伤,ATP减少,氧自由基增多,引起膜的脂质过氧化,细胞通透性增高,钙离子内流,钙离子浓度增加可激活钙以来蛋白酶、磷脂酶及核内切酶,导致细胞膜损伤以及细胞的关键蛋白和膜的降解,最终引起细胞坏死,而后进步加重纤维化。
肝硬化肝脏切除42%后,对于犬来说已经足够启动其再生机制。无论是正常再生还是肝硬化细胞坏死后再生,均依赖于线粒体能否提供足够的能量,而线粒体代谢水平的该地,与肝内血氧分压高低呈正相关[10,11]。因此,施行PVA手术的A组肝细胞的再生分裂较未施行PVA的B组活跃。
4 小结
本实验通过对比是否使用PVA技术,来评估硬化肝脏部分切除术后肝脏的再生能否改善肝脏功能,减低肝脏硬化的程度、加快再生速度。实验结果表明:PVA确实有促进肝细胞合成,减少纤维组织生成,改善肝细胞功能的作用。PVA技术不失为一种改善肝硬化预后的可行方法,在临床上具有一定的应用前景。作为对门静脉动脉化的一系列研究的开端,本实验对PVA技术对肝硬化的作用作了初步探讨,今后还将对其进行更加深入的研究。
参考文献
[1] Burd AD,Oakley CL lecture.Cellular and molecular aspects of hepatic fibrosis.J Pathol,1993,170:105114.
[2] 牛廷献,史智勇.肝纤维化动物模型的研究进展.实验动物科学与管理,1997,14(3):27.
[3] Cohn R.Some effects upon the liver of complete arterializations of its blood supply.Surgery,1952,32:214~219.
[4] Yamazoe K,Yanai T,Matsuki N,et al.Hepatic oxygen supply,energy charge,and histological findings in dogs with portal vein arterializations.J Vet Med Sci,1997,59(11):10571061.
[5] Erhard J,Von Schonfeld J,Lange R,et al.Auxiliary rat liver transplantation with portal vein arterializations in acute hepatic failure.Transplantation,2000,15,70(1):7378.
[6] Euchi S,Sugiyama N,Kawazoe Y,et al.Total blood exchange suppresses the early stage of liver regenerationfollowing partial hepatectomy in rats.Artif Organ,1998,22(10):847853.
[7] WachsteinMcisel.Histochemistry of hepatic phosphatase at a physiologic PH with special reference to the demonstration of bile canaliculi.London,1975,27:13.
[8] Gong J,Traganos F,Darzynkiewicz Z.A selective procedure for DNA extraction from apoptotic cells applicable for gel electrophoresis and flow cytometry.Ana Bioch,1994,218:314319.
[9] Polyak K,Lee MH,Erdiu mentBromage H,et al.Cloning of p27kipl,a cyclindependent kinase inhibitor and potential mediator of extra cellular antimitogenic signal.Cell,1994,78:5966.
[10] Henderson JM,Millikan WL,Hooks M,et al.Increased galactose clearance after liver transplantation,Ameasure of increased blood flow through the denervated liver.Hepatology,1989,10(1):288291.
[11] Pamela ML,Rsza Z,Gerge K.Hepatocyte growth factor(hepatopoietin A)rapidly increase in plasma befor DNA synthesis and liver regeneration stimulated by patial hepatectomy and carbon Tetracbloride administration.Hepatology,1991,13(4):743749.
【关键词】
门静脉动脉化;肝硬化
The effects of portal vein arterialization and party hepatectomy to the hepatocirrhosis
ZHOU Qiang,PENG Yubing.The Eighth people’s Hospital of Shanghai,Shanghai 200235,China
【Abstract】 Objective To investigate the effects of portal vein arterializations(PVA)on hepatocirrhosis after party hepatectomy,proved that the PVA can increase the regeneration after party hepatectomy,and improve the hepatocirrhosis.Methods The cirrhosis model dogs were allocated randomly into three groups,dogs in group A received PVA after 42%liver resection,in group B underwent 42%liver resection only,group C was control group.During the experiment,Before operation,we used the color Doppler senograph to measure the hemodynamic change,the blood was taken to study the alteration of liver function and we use the immunohistochemical technique to exam CD34 of specimens.Results In group A liver weight is significant higher than group B(P<0.01)。The improvement ofliver function was also faster in group A。The blood flew of group A was higher than other two groups in 2 ds(P<0.05).In group A the vascular area defined by endothelial cells that stained for CD34 was higher than two groups.Conclusion ①The portal vein arterializations improve the cirrhosis liver function after partyhepatectomy.②The portal vein arterializations increase the liver regeneration and improve the hepatocirrhosis.
【Key words】
Portal vein arterializations; Hepatocirrhosis
DOI:10.3760/cma.j.issn 16738799.2010.01.12
作者单位:200235上海市第八人民医院
肝硬化是一种或多种因素长期或反复损伤肝脏实质,导致结缔组织弥漫性增生伴有肝细胞结节状再生的慢性过程[1]。目前唯一的根治手段是肝移植。临床对肝硬化的治疗,以各种药物缓解硬化进程,防止并发症为主,外科不同方式的分流和断流手术,只能对症处理门脉高压引起的脾亢、腹水、静脉曲张破裂等并发症。在临床和实验治疗肝功能衰竭和部分肝移植的医疗实践中,使用控制性的门静脉动脉化技术被证实是一种有效改善肝细胞功能的手段。
本课题使用文献2的方法制作犬肝硬化模型,随机分为3组,给予不同的手术处理,验证门静脉动脉化是否能缓解肝硬化程度,促进肝脏再生,从而探讨一种可能的新的治疗肝硬化的外科手段。
1 材料与方法
1.1 动物来源及肝硬化模型制作
健康成年杂种犬24只,雌雄各12只,体重9~10 kg。参考文献3的方法,所有犬每周腹腔内2次注射CCI4(40%)与花生油(60%)混合剂,剂量0.12 ml/kg,共八周,犬饲料含10%猪油,饮用水含10%乙醇。3~4周后所有犬出现肝硬化。制作过程中,2只犬死亡,雌雄各一。
1.2 实验分组及处理 剩余22只犬随机分组:A组9只,B组8只,C组5只。A组肝脏左外侧叶切除+门静脉动脉化;B组肝脏左外侧叶切除;C组假手术组。
1.3 实验手术方法 动静脉吻合方式:使用胃十二指肠与门静脉主干距肝门1 cm处左外侧行端侧吻合。肝脏切除范围:单纯左外侧叶切除,占肝脏总重量42%。
1.4 术后管理 ①手术中A、B各组各有一只犬死亡,雌雄各一;②术后1周A组一只犬死亡(雄性),术后2周B组又有一只犬死亡(雄性);③术后28 d所有犬麻醉开腹,行多普勒超声检查,取全肝称重,部分肝组织甲醛固定。
1.5 实验指标 ①彩色多普勒超声检测:Acsonl 128XP/10电脑超声测量犬的门静脉最大流速、门静脉每分流量;②肝功能指标:TBIL、ALT、ALB;③肝脏再生指标:肝再生率SE=(术后处死时肝重/体重)/(术前肝重/体重);④免疫组化检测血管内皮细胞标记抗原CD34。
1.6 统计学方法 所有表格内统计数据以(x±s)表示,组间差异分析采用方差分析,组间两两比较实用T检验,所有统计学处理均采用Stata6.0软件完成。
2 结果
2.1 多普勒血流动力学指标
2.1.1 门静脉最大流速 硬化造模后的门静脉流速有所下降,A组在动脉化后上升了约3 cm/s,高于B组(P<0.05),仍然低于造模前正常肝门静脉流速。
2.1.2 门静脉每分流量 A组的血流量在术后即可明显上升,高于B组(P<0.05),术后2 d仍高于B、C组,但再后已无统计学意义,说明门静脉动脉化后入肝血流量增加在早期较明显。
2.2 肝功能指标
2.2.1谷丙转氨酶ALT A组ALT在术后初期与B组无明显差异,术后2周A组的ALT值恢复优于B组(P<0.01),术后4周该值低于造模后,提示PVA对肝细胞功能恢复的作用。
2.2.2 血清白蛋白ALB A組的白蛋白合成能力强于B组,其术后1周的统计值优于本组术前,也高于B、C组同期统计值(P<0.05)。
2.2.3血清总胆红素TBIL 术后2 d,A组的TBIL值下降快于B组(P<0.01),但1周后3组TBIL无明显统计学差异,提示该术式肝叶切除不导致明显胆红素的变化
2.2.4肝脏再生指标 评价肝脏再生能力的肝脏再生率SE值(12)=(术后处死时肝重/体重)/(术前肝重/体重),A组(7例)SE:86.6±2.9;B组(6例)SE:7 3.7±6.9,数据表明A组肝再生率高于B组(P<0.01)。
2.2.5 新生血管免疫组化指标CD23
A组(7例)造模后(175.5±31.3)、28 d后(263.9±35.3);B组(6例)造模后(183.0±24.1)、28 d后(208.5±17.8);C组(5例)造模后(184.0±23.1)、28 d后(179.8±16.5);动脉化组的CD23阳性计数多于非动脉组(P<0.05),说明动脉化组促进了内皮细胞的生成。
表1
血流动力学指标分组造模前造模后术后即时术后2 d术后14 d
门静脉最大流速Vmax(cm/s)
A22.2±2.1817.94±1.7020.47±2.3820.27±2.0519.36±1.89
B21.16±2.8917.97±1.9317.47±1.7716.93±1.7916.00±2.09
C20.66±2.3817.76±2.68
门静脉每分流量(ml/min)
A311.6±114.3344.9±80.1444.69±153.82404.2±108.3372.6±112.5
B286.1±101.8353.3±95.2317.10±36.96364.9±79.8343.9±84.3
C292.0±139.4366.5±121.5
表2
指标分组造模前造模后术后2 d术后7 d术后14 d
ALT(U/L)A60.5.6±15.4149.9±35.7322.0±90.5206.5±78.3114.7±42.7
B61.9±15.5129.2±38.3389.4±80.5235.4±64.1176.8±45.0
C53.8±19.7108.8±30.3110.3±28.6102.3±18.596.8±30.1
ALB(g/L)A40.6±10.035.3±10.326.3±6.630.8±7.233.0±7.1
B37.1±7.531.0±7.021.2±3.622.6±3.424.0±3.5
C32.3±6.528.6±5.2326.8±6.228.4±6.029.1±5.4
TBIL(μmol/L)A40.6±10.035.3±10.326.3±6.630.8±7.233.0±7.1
B37.1±7.531.0±7.021.2±3.622.6±3.424.0±3.5
C32.3±6.528.6±5.2326.8±6.228.4±6.029.1±5.4
3 讨论
门静脉动脉化(PVA)是指通过建立动脉与门静脉或其分支之间的通路,以动脉血增加或替代门静脉血灌注肝脏的手术方法。最初是由Cohn[3]1952年根据门腔分流术后肝灌注减少,肝性脑病发生率升高而提出。其最早用于肝硬化端侧门体分流术的患者,该术式可以防止术后肝衰,降低肝性脑病发生率[4,5],其对于改善肝细胞代谢环境的作用是肯定的。
PVA无固定的手术方式,已知的包括肝动脉门静脉,胃十二指肠动脉门静脉,肝总动门静脉,肾动脉门静脉等等。研究证实,动脉化导致门静脉的血流动力学改变必须控制在一定范围以内,才能保证肝脏的正常生理功能[6]。动脉化导致门静脉的血流量超过正常流量的一倍,则导致肝内门静脉分支增宽,内膜纤维变性,以及肝细胞微粒体酶活力的改变,内皮细胞损伤,Disse间隙增宽[7]。由于肝硬化时门静脉压力已经高于正常,该技术的使用关键是对入门静脉血流量进行控制。选择尽量不触动肝门解剖,同时为了控制血流量,使用胃十二指肠动脉与门静脉吻合的术式,术后多普勒表明血流量上升了25%~30%。
本实验中,在已经形成肝硬化,假小叶生成的情况下,使用PVA技术得到了肝脏细胞外基质水平降低,肝功能好转的结果,其原因可能是再生机制的启动和汇管区、Disse间隙血氧供应改善同时作用的结果。正常情况下,肝细胞有两面与血液直接接触,这是细胞完成代谢的生理基础,而且肝细胞从低氧的门静脉血液中摄氧的能力也高于机体其他细胞[8,9]。肝硬化时,肝细胞与血液直接接触面积减少,吸收氧的能力和营养物质大大减少,细胞线粒体代谢呼吸链缺氧而损伤,ATP减少,氧自由基增多,引起膜的脂质过氧化,细胞通透性增高,钙离子内流,钙离子浓度增加可激活钙以来蛋白酶、磷脂酶及核内切酶,导致细胞膜损伤以及细胞的关键蛋白和膜的降解,最终引起细胞坏死,而后进步加重纤维化。
肝硬化肝脏切除42%后,对于犬来说已经足够启动其再生机制。无论是正常再生还是肝硬化细胞坏死后再生,均依赖于线粒体能否提供足够的能量,而线粒体代谢水平的该地,与肝内血氧分压高低呈正相关[10,11]。因此,施行PVA手术的A组肝细胞的再生分裂较未施行PVA的B组活跃。
4 小结
本实验通过对比是否使用PVA技术,来评估硬化肝脏部分切除术后肝脏的再生能否改善肝脏功能,减低肝脏硬化的程度、加快再生速度。实验结果表明:PVA确实有促进肝细胞合成,减少纤维组织生成,改善肝细胞功能的作用。PVA技术不失为一种改善肝硬化预后的可行方法,在临床上具有一定的应用前景。作为对门静脉动脉化的一系列研究的开端,本实验对PVA技术对肝硬化的作用作了初步探讨,今后还将对其进行更加深入的研究。
参考文献
[1] Burd AD,Oakley CL lecture.Cellular and molecular aspects of hepatic fibrosis.J Pathol,1993,170:105114.
[2] 牛廷献,史智勇.肝纤维化动物模型的研究进展.实验动物科学与管理,1997,14(3):27.
[3] Cohn R.Some effects upon the liver of complete arterializations of its blood supply.Surgery,1952,32:214~219.
[4] Yamazoe K,Yanai T,Matsuki N,et al.Hepatic oxygen supply,energy charge,and histological findings in dogs with portal vein arterializations.J Vet Med Sci,1997,59(11):10571061.
[5] Erhard J,Von Schonfeld J,Lange R,et al.Auxiliary rat liver transplantation with portal vein arterializations in acute hepatic failure.Transplantation,2000,15,70(1):7378.
[6] Euchi S,Sugiyama N,Kawazoe Y,et al.Total blood exchange suppresses the early stage of liver regenerationfollowing partial hepatectomy in rats.Artif Organ,1998,22(10):847853.
[7] WachsteinMcisel.Histochemistry of hepatic phosphatase at a physiologic PH with special reference to the demonstration of bile canaliculi.London,1975,27:13.
[8] Gong J,Traganos F,Darzynkiewicz Z.A selective procedure for DNA extraction from apoptotic cells applicable for gel electrophoresis and flow cytometry.Ana Bioch,1994,218:314319.
[9] Polyak K,Lee MH,Erdiu mentBromage H,et al.Cloning of p27kipl,a cyclindependent kinase inhibitor and potential mediator of extra cellular antimitogenic signal.Cell,1994,78:5966.
[10] Henderson JM,Millikan WL,Hooks M,et al.Increased galactose clearance after liver transplantation,Ameasure of increased blood flow through the denervated liver.Hepatology,1989,10(1):288291.
[11] Pamela ML,Rsza Z,Gerge K.Hepatocyte growth factor(hepatopoietin A)rapidly increase in plasma befor DNA synthesis and liver regeneration stimulated by patial hepatectomy and carbon Tetracbloride administration.Hepatology,1991,13(4):743749.