野葛种质的玻璃化法超低温保存

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野葛的玻璃化法超低温保存技术实验结果表明:采用无菌苗置4℃冰箱低温锻炼5d;在无菌条件下切取1,5cm的带芽茎段,转至含5%二甲基亚砜+5%蔗糖的培养基内,置4℃冰箱预培养1d;用60%的PVS:(30%甘油+15%乙二醇+15%二甲基亚砜+0.4mol/L蔗糖)和100%的PVS,分别在0℃条件下过渡和脱水各30min,随即投入液氮;保存24h后,在40℃水浴中快速化冻90S,用含1.2mol/L蔗糖的MS培养液洗涤2次,每次停留10min;转至再生培养基MS+BA2mg/L+NAA1mg/L暗处培养7
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