【摘 要】
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目的建立快速准确、全面客观的判断前哨淋巴结转移状态的分子病理检查方法。方法合成细胞角蛋白19(CK19)的环介导等温扩增(LAMP)引物,应用LAMP技术扩增乳腺癌细胞MCF-7的cDNA
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目的建立快速准确、全面客观的判断前哨淋巴结转移状态的分子病理检查方法。方法合成细胞角蛋白19(CK19)的环介导等温扩增(LAMP)引物,应用LAMP技术扩增乳腺癌细胞MCF-7的cDNA,验证引物序列的可靠性;通过RT-LAMP技术分别检测MCF-7、Daudi、Namawal细胞的RNA,验证实验体系的可行性;将手术获取的乳腺癌患者前哨淋巴结行RT-LAMP检测CK19表达,与常规病理学方法的检测结果相对比,最终通过荧光定量以及离心观测沉淀等手段缩短整体检测时间。结果应用LAMP技术能够检测到MCF-7乳腺癌细胞的CK19表达,而Daudi、Namawal细胞CK19的表达均为阴性;经病理检查证实为癌转移阳性的3枚前哨淋巴结,通过RT-LAMP均检测到CK19表达;经荧光定量及离心观测沉淀等手段优化后反应时间可以缩短至1h之内。结论 LAMP检测CK19表达,能够准确区分上皮来源细胞和淋巴瘤细胞,检测转移阳性淋巴结的结果与常规病理学结果完全符合,其具有简便、准确、快速等优点。
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