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在pH 3.5～4.0的NaAc-HCl介质中,乙基曙红与蛋白质结合形成复合物,溶液颜色发生变化,最大吸收波长为548 nm,比乙基曙红红移了28 nm,并在520 nm处产生最大褪色,其吸收或褪色作用均可用于蛋白质的分光光度测定.在最大吸收波长548 nm处,蛋白质的浓度在0.23～20.0 μg*mL-1(HSA)和0.25～17.5 μg*mL-1(BSA)范围内与吸光度成正比, 其表观摩尔吸光系数分别为1.33×106 L*mol-1*cm-1(BSA)和1.26×106 L*