【摘 要】
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目的建立新生Long Evans大鼠视皮层神经元原代培养方法。方法采用钝性分离1d龄Long Evans大鼠双侧视皮层,2.5g·L-1胰蛋白酶消化法获得细胞悬液,在无血清培养基中进行培
【机 构】
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重庆大学生物工程学院,第三军医大学西南医院眼科
【基金项目】
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国家自然科学基金资助（编号：81070749、30800213）
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目的建立新生Long Evans大鼠视皮层神经元原代培养方法。方法采用钝性分离1d龄Long Evans大鼠双侧视皮层,2.5g·L-1胰蛋白酶消化法获得细胞悬液,在无血清培养基中进行培养,7～14d后行免疫组织化学及膜片钳鉴定。结果用该方法培养的视皮层神经细胞存活率高,生长状态良好,存活可达1个月左右,β-III tubulin免疫组织化学染色阳性神经元占培养细胞中的80%以上,膜片钳成功记录了180个细胞,静息膜电位在-50～-70mV,存在内向、外向电流,脉冲恒流刺激可诱发多个动作电位。结
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