【摘 要】
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目的 探究藤梨根提取物对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、迁移、侵袭及糖酵解的影响.方法 MDA-MB-231细胞经藤梨根提取物处理后,MTT试验与克隆形成试验检测细胞增殖能力;划痕试验
【机 构】
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衢州职业技术学院医学院,浙江衢州324000;天津医科大学药学院,天津300070
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目的 探究藤梨根提取物对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、迁移、侵袭及糖酵解的影响.方法 MDA-MB-231细胞经藤梨根提取物处理后,MTT试验与克隆形成试验检测细胞增殖能力;划痕试验和Transwell试验检测细胞迁移和侵袭,Western blotting检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达情况,采用葡萄糖摄取试剂盒和乳酸检测试剂盒检测细胞葡萄糖摄取量和乳酸生成量,采用Western blotting检测细胞内M2型丙酮酸激酶(PKM2),葡萄糖转运体1(GLUT1)和乳酸脱氢酶A(LDHA)以及Akt-mTOR介导的自噬信号通路相关蛋白表达情况.结果 与对照组比较,10 mg·mL-1藤梨根提取物能显著抑制MDA-MB-231细胞的细胞活性(P＜0.05),而浓度为0.1和1 mg·mL-1的藤梨根提取物则对细胞活性无明显影响.藤梨根提取物能够剂量依赖性地抑制MDA-MB-231细胞的克隆形成率、迁移率、侵袭细胞数量、葡萄糖摄取量和乳酸生成量(P均＜0.05).藤梨根提取物(1 μg·mL-1和10 μg·mL-1)能够减少细胞迁移标记蛋白(MMP-2和MMP-9)的表达,抑制糖酵解相关蛋白PKM2,GLUT1和LDHA的表达(P均＜0.05).此外,藤梨根提取物抑制了Akt/mTOR信号通路中关键蛋白的活性,减少了p-Akt和p-mTOR表达,促进LC3I转化为LC3II,上调自噬相关蛋白Beclin1,下调自噬标记蛋白p62,增强MDA-MB-231细胞自噬活性(P均＜0.05).结论 藤梨根提取物抑制细胞增殖、迁移、侵袭和糖酵解,其作用可能与失活Akt-mTOR途径诱导的自噬有关.
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