【摘 要】
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目的研究腹透液中葡萄糖对人腹膜间皮细胞(HPMCs)分泌蛋白质影响,并采用蛋白质组学方法分析其对腹膜纤维化和腹膜功能的影响.方法采用胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离HPMCs
【机 构】
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长沙,湘雅三院肾内科,湘雅医院医学实验研究中心
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目的研究腹透液中葡萄糖对人腹膜间皮细胞(HPMCs)分泌蛋白质影响,并采用蛋白质组学方法分析其对腹膜纤维化和腹膜功能的影响.方法采用胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离HPMCs,第3代用于实验.实验分组:对照组(F12培养基)和高糖组(F12培养基+4%葡萄糖),分别观察24 h和48 h.经二维凝胶电泳(2-DE)分离人腹膜间皮细胞总蛋白,每组重复3次,PDQuest图象分析软件比较对照组和高糖组平均凝胶,求差异蛋白质.采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定部分差异蛋白质.结果获得12块经2-DE分离的分离胶,每组3块.通过PDQuest图象分析软件发现24 h高糖组与对照组比较有27种蛋白质表达有差异(P＜0.05);48 h高糖组与对照组比较有50种蛋白质的表达有差异(P＜0.05),表达上调有22个蛋白质斑点,表达下调有55个蛋白质斑点;对其中23个差异蛋白质斑点进行了肽质指纹图分析,鉴定出23种蛋白质,其中有2个点为同一蛋白质.这些蛋白质涉及到高糖对HPMCs的细胞骨架、糖代谢、黏附、细胞因子、抗氧化剂、表面活性剂等物质的调节.结论高糖导致腹膜纤维化是多因素、多途径,要防止腹膜透析腹膜纤维化保护腹膜透析效能,最好避免过多使用高糖透析液.
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