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摘 要：目的：观察黑骨头乙醇提取物的抗炎镇痛作用。方法：采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加模型观察黑骨头的抗炎作用；采用热板法、醋酸扭体法观察黑骨头的镇痛作用。结果：黑骨头可有效提高小鼠痛阈值(P＜0.01)和抑制小鼠醋酸扭体反应率(P＜0.05)；对二甲苯所致小鼠耳肿胀有显著抑制作用(P＜0.01)；对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加也有抑制作用(P＜0.05)。结论：黑骨头具有较好的抗炎、镇痛作用。
关键词：黑骨头；抗炎；镇痛；实验研究
中图分类号：R285．5 文献标识码：A
文章编号：1007-2349(2008)01-0035-02
黑骨头(Periploca forrestii Schlechter)又名铁骨头、青蛇胆、达风藤、黑风藤等，常绿攀援藤本，根或全株入药；有通经络。祛风湿，消炎，活血等功效；用于治疗风湿性关节炎，跌打损伤等。目前国内外尚未见其抗炎、镇痛作用的报道。本研究观察了黑骨头乙醇提取物对小鼠的抗炎、镇痛作用，现总结报告如下。
1 实验材料
1．1 药物 实验用黑骨头，采集于楚雄永仁，由大理学院生药学教研室马晓匡教授鉴定。采后自然阴干，切碎。称取6000g，用乙醇浸泡、浓缩得浸膏303g，即1g浸膏相当于19.80g生药，临用前取浸膏分别用水配制成低(0.175％)、中(0.350％)、高(0.700％)3个剂量组的黑骨头混悬液，依次含生药700mg，1400mg，2800mg；阿司匹林肠溶片(昆明云健制药有限公司，批号：20070140)；冰醋酸(西安化学试剂厂，批号：901209)；伊文思蓝(上海化学试剂采购供应站经销行校办厂分装，批号：82-11-02)。
1．2 动物 昆明种小鼠．体重18～22g，雌雄各半，由四川省动物研究所提供，动物合格号：SCXK(川)2004-50。
1．3 仪器 722光栅分光光度计(上海生化仪器厂生产)；电热恒温水温箱(上海医疗器械七厂；型号：HH-W21-Cu600)；电子天平[梅特勒一托利多仪器(上海)有限公司；型号：AL204-1C]；秒表(上海星钻秒表有限公司)。
2 实验方法与结果
2．1 镇痛实验
2．1．1 小鼠热板法 实验前筛选雌性小鼠。将其置于55±0.5℃的热板上。以放置于热板上至小鼠首次舔后足所需时间为该鼠的正常痛阈值。将痛阈值小于5s或．大于30s或跳跃的小鼠弃用。痛阈值合格(5～30s)的小鼠，再次测正常痛阈值，取2次测试结果平均值，作为该鼠给药前痛阈值(2次测试问隔≥15min)。取合格小鼠50只，随机分为5组：N.S组；阿司匹林组(150mg／kg)；黑骨头低、中、高剂量组。各给药组连续灌胃给药7d，2次／d，阿司匹林为1次／d，给药量均为0.2ml／10g，末次给药15rain，30min，60min，90min后分别测定小鼠痛阈值1次，若60s仍无反应，将小鼠取出，其痛阈值以60s计算。结果见表1。
实验结果显示，黑骨头3个剂量组均有一定的提高小鼠痛阈值的作用，且峰值出现较快(15min)，持续15rain后开始下降。黑骨头中剂量作用最为明显(P＜0.01)且持续时间较长。
2．1．2 小鼠扭体法 取体重18～22g小鼠50只，雌雄各半，分组与给药同2．1．1。末次给药30min后，腹腔注射0.7％醋酸溶液0.1ml／10g，观察小鼠在注射20min内因疼痛而产生扭体反应的次数(以腹腔内凹，伸展后肢，臀部抬高为标准)，计算扭体反应抑制率。扭体反应抑制率(％)=[(对照组平均扭体次数-给药组平均扭体次数)÷对照组平均扭体次数]×100％。扭体反应抑制率小于25％为无镇痛作用，在25％～40％为弱镇痛作用，在40％～55％为中度镇痛作用，大于55％为强镇痛作用，结果见表2。
结果显示，黑骨头高剂世具有抑制小鼠醋酸扭体反应的作用(P＜0.05)，其镇痛率低于阿司匹林。
2．2 抗炎实验
2．2．1小鼠二甲苯耳廓肿胀法 取体重18～22g小鼠50只，雌雄各半，分组与给药同2．1．1。末次给药30min后。各组小鼠右耳涂以二甲苯0.05ml／只敛炎，左耳对照。30min后处死动物，用直径为7mm打孔器分别于左、右耳廓的对称部位取下两圆耳片，精确称重。以左右耳片重量之差为肿胀度，计算肿胀抑制率，肿胀抑制率(％)=[(埘照组平均肿胀度一给药组平均肿胀度)÷对照组平均肿胀度]×100％。结果见表3。
结果显示，黑骨头低、中、高剂量组均对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有明显抑制作用(P＜0.05，P＜0.01)，其抑制率均在50％以上，抑制率随剂量的增大而增大。
2．2．2 对腹腔毛细血管通透性的影响 取体重18～22g小鼠50只，雌雄各半，分组与给药同2．1．1。末次给药30min后，鼠尾静脉注射0.5％伊文思蓝溶液0.1ml／10g，随后立即腹腔注射0.7％冰醋酸溶液0.1ml／10g，30min后脱颈椎处死动物，用6ml生理盐水洗涤腹腔，收集全部腹腔液于试管中，3000r／min离心15min，取上清液于590nm波长下比色，测定光密度。计算抑制率(％)=[(对照组平均光密度一给药组平均光密度)÷对照组平均光密度]×100％，结果见表4。
结果显示，黑骨头中、高剂量组均对醋酸引起小鼠腹腔毛细血管通透性增加有显著的抑制作用(P＜0.05)，抑制率随剂量的增大呈上升趋势。
3 讨论
黑骨头民间主要用于风湿性关节炎，跌打损伤，胃痛，消化不良等。目前国内外尚未见其抗炎、镇痛作用的报道，仅见生药方面的研究。黑骨头的镇痛实验反映其各剂量组均有镇痛作用(P＜0.05，P＜0.01)，且起效时间较快，但持续时间相对较短。热板法显示黑骨头中浓度的镇痛作用效果最好(P＜0.01)，起效快、持续时间也较长。实验中抗炎部分证明，黑骨头各剂量组的抗炎作用均较明显(P＜0.05，P＜0.01)，能有效抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀度和醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性的增加。以上实验提示，黑骨头具有良好的抗炎、镇痛作用。但有关黑骨头的抗炎、镇痛机制尚不清楚，有待进一步研究确定。
关键词：黑骨头；抗炎；镇痛；实验研究
中图分类号：R285．5 文献标识码：A
文章编号：1007-2349(2008)01-0035-02
黑骨头(Periploca forrestii Schlechter)又名铁骨头、青蛇胆、达风藤、黑风藤等，常绿攀援藤本，根或全株入药；有通经络。祛风湿，消炎，活血等功效；用于治疗风湿性关节炎，跌打损伤等。目前国内外尚未见其抗炎、镇痛作用的报道。本研究观察了黑骨头乙醇提取物对小鼠的抗炎、镇痛作用，现总结报告如下。
1 实验材料
1．1 药物 实验用黑骨头，采集于楚雄永仁，由大理学院生药学教研室马晓匡教授鉴定。采后自然阴干，切碎。称取6000g，用乙醇浸泡、浓缩得浸膏303g，即1g浸膏相当于19.80g生药，临用前取浸膏分别用水配制成低(0.175％)、中(0.350％)、高(0.700％)3个剂量组的黑骨头混悬液，依次含生药700mg，1400mg，2800mg；阿司匹林肠溶片(昆明云健制药有限公司，批号：20070140)；冰醋酸(西安化学试剂厂，批号：901209)；伊文思蓝(上海化学试剂采购供应站经销行校办厂分装，批号：82-11-02)。
1．2 动物 昆明种小鼠．体重18～22g，雌雄各半，由四川省动物研究所提供，动物合格号：SCXK(川)2004-50。
1．3 仪器 722光栅分光光度计(上海生化仪器厂生产)；电热恒温水温箱(上海医疗器械七厂；型号：HH-W21-Cu600)；电子天平[梅特勒一托利多仪器(上海)有限公司；型号：AL204-1C]；秒表(上海星钻秒表有限公司)。
2 实验方法与结果
2．1 镇痛实验
2．1．1 小鼠热板法 实验前筛选雌性小鼠。将其置于55±0.5℃的热板上。以放置于热板上至小鼠首次舔后足所需时间为该鼠的正常痛阈值。将痛阈值小于5s或．大于30s或跳跃的小鼠弃用。痛阈值合格(5～30s)的小鼠，再次测正常痛阈值，取2次测试结果平均值，作为该鼠给药前痛阈值(2次测试问隔≥15min)。取合格小鼠50只，随机分为5组：N.S组；阿司匹林组(150mg／kg)；黑骨头低、中、高剂量组。各给药组连续灌胃给药7d，2次／d，阿司匹林为1次／d，给药量均为0.2ml／10g，末次给药15rain，30min，60min，90min后分别测定小鼠痛阈值1次，若60s仍无反应，将小鼠取出，其痛阈值以60s计算。结果见表1。
实验结果显示，黑骨头3个剂量组均有一定的提高小鼠痛阈值的作用，且峰值出现较快(15min)，持续15rain后开始下降。黑骨头中剂量作用最为明显(P＜0.01)且持续时间较长。
2．1．2 小鼠扭体法 取体重18～22g小鼠50只，雌雄各半，分组与给药同2．1．1。末次给药30min后，腹腔注射0.7％醋酸溶液0.1ml／10g，观察小鼠在注射20min内因疼痛而产生扭体反应的次数(以腹腔内凹，伸展后肢，臀部抬高为标准)，计算扭体反应抑制率。扭体反应抑制率(％)=[(对照组平均扭体次数-给药组平均扭体次数)÷对照组平均扭体次数]×100％。扭体反应抑制率小于25％为无镇痛作用，在25％～40％为弱镇痛作用，在40％～55％为中度镇痛作用，大于55％为强镇痛作用，结果见表2。
结果显示，黑骨头高剂世具有抑制小鼠醋酸扭体反应的作用(P＜0.05)，其镇痛率低于阿司匹林。
2．2 抗炎实验
2．2．1小鼠二甲苯耳廓肿胀法 取体重18～22g小鼠50只，雌雄各半，分组与给药同2．1．1。末次给药30min后。各组小鼠右耳涂以二甲苯0.05ml／只敛炎，左耳对照。30min后处死动物，用直径为7mm打孔器分别于左、右耳廓的对称部位取下两圆耳片，精确称重。以左右耳片重量之差为肿胀度，计算肿胀抑制率，肿胀抑制率(％)=[(埘照组平均肿胀度一给药组平均肿胀度)÷对照组平均肿胀度]×100％。结果见表3。
结果显示，黑骨头低、中、高剂量组均对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有明显抑制作用(P＜0.05，P＜0.01)，其抑制率均在50％以上，抑制率随剂量的增大而增大。
2．2．2 对腹腔毛细血管通透性的影响 取体重18～22g小鼠50只，雌雄各半，分组与给药同2．1．1。末次给药30min后，鼠尾静脉注射0.5％伊文思蓝溶液0.1ml／10g，随后立即腹腔注射0.7％冰醋酸溶液0.1ml／10g，30min后脱颈椎处死动物，用6ml生理盐水洗涤腹腔，收集全部腹腔液于试管中，3000r／min离心15min，取上清液于590nm波长下比色，测定光密度。计算抑制率(％)=[(对照组平均光密度一给药组平均光密度)÷对照组平均光密度]×100％，结果见表4。
结果显示，黑骨头中、高剂量组均对醋酸引起小鼠腹腔毛细血管通透性增加有显著的抑制作用(P＜0.05)，抑制率随剂量的增大呈上升趋势。
3 讨论
黑骨头民间主要用于风湿性关节炎，跌打损伤，胃痛，消化不良等。目前国内外尚未见其抗炎、镇痛作用的报道，仅见生药方面的研究。黑骨头的镇痛实验反映其各剂量组均有镇痛作用(P＜0.05，P＜0.01)，且起效时间较快，但持续时间相对较短。热板法显示黑骨头中浓度的镇痛作用效果最好(P＜0.01)，起效快、持续时间也较长。实验中抗炎部分证明，黑骨头各剂量组的抗炎作用均较明显(P＜0.05，P＜0.01)，能有效抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀度和醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性的增加。以上实验提示，黑骨头具有良好的抗炎、镇痛作用。但有关黑骨头的抗炎、镇痛机制尚不清楚，有待进一步研究确定。