探讨磷酸肌醇3激酶(PI3K)和信息转导转录激活子6(STAT6)对支气管哮喘(简称哮喘)患者T淋巴细胞增殖的意义
方法收集2004年8月至2005年2月哮喘患者(哮喘组)和正常对照者(对照组)的外周血标本各15例,体外分离获得并培养两组外周血CD4+和CD8+ T淋巴细胞,其中哮喘组CD4+和CD8+ T淋巴细胞根据加入PI3K和STAT6的抑制剂LY294002和γ干扰素(IFN-γ)的不同分为4组,分别为对照组(A组)、LY294002组(B组)、IFN-γ组(C组)和LY294002+IFN-γ组(D组),用流式细胞术检测细胞周期的时相分布、细胞周期调节蛋白(P27kipl、Cyclin D、Cyclin E)、PI3K和STAT6的表达水平
结果(1)哮喘组CD4+、CD8+T淋巴细胞的Go/G1期分布比例、P27kipl表达水平分别为82.0%、44.6%、13.2%、4.5%,对照组分别为99.0%、100.0%、47.2%、46.3%,两组比较差异有统计学意义(Z值分别为3.54、4.23、3.09、2.51,P分别＜0.01、0.05);哮喘组CD4+、CD8+T淋巴细胞S期分布比例、Cyclin E、PI3K和STAT6表达水平分别为18.0%、51.7%、7.9%、9.3%、7.6%、8.7%、8.2%、6.3%,对照组分别为0.2%、0.0%、3.7%、3.5%、3.3%、3.4%、1.9%、2.4%,两组比较差异有统计学意义(Z值分别为2.88、4.61、1.95、2.06、2.51、2.32、4.38、2.22,P均＜0.05);(2)B组CD4+T淋巴细胞G0/G1、S期分布比例、Cyclin D、Cyclin E表达水平分别为95.6%、1.9%、13.3%、3.1%,A组分别为82.0%、18.0%、35.0%、7.9%,B组与A组比较差异有统计学意义(Z值分别为2.04、2.23、2.78、1.99,P均＜0.05);B组CD8+T淋巴细胞S期分布比例、Cyclin E分别为1.0%、4.1%,A组分别为51.7%、9.3%,B组与A组比较差异有统计学意义(Z值分别为3.06、2.56,P均＜0.05);C组CD4+T淋巴细胞的G0/G1、S期分布比例、P27kipl表达水平分别为94.0%、1.5%、46.1%,A组分别为82.0%、18.0%、13.2%,C组与A组比较差异有统计学意义(Z值分别为2.17、2.54、2.81,P均＜0.05);C组CD8+T淋巴细胞S期分布比例、P27kipl表达水平分别为10.8%、23.1%,A组分别为51.7%、4.5%,两组比较差异有统计学意义(Z值分别为2.67、2.05,P均＜0.05);D组CD4+T淋巴细胞G0/G1、S期分布比例、P27kipl、Cyclin D表达水平分别为97.0%、0.0%、40.4%、21.5%,A组分别为82.0%、18.0%、13.2%、35.0%,D组G0/G1、S期分布比例、P27kipl、Cyclin D水平与A组比较差异有统计学意义(Z值分别为2.73、2.79、2.56、2.10,P均＜0.05);D组CD8+T淋巴细胞Go/G1、S期分布比例分别为92.1%、1.7%,A组分别为44.6%、51.7%,两组比较差异有统计学意义(Z值分别为2.22、3.12,P均＜0.05)
结论PI3K、STAT6蛋白在哮喘患者T淋巴细胞亚群增殖中可望作为干预哮喘T淋巴细胞过度增殖的靶点,但PI3K和转录激活子6通路(JAK1-STAT6)信号转导途径在介导哮喘中的相互关系有待深入研究.