CⅡTA反义cDNA抑制Hela细胞表面MHCⅡ类抗原的表达

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目的探讨Ⅱ类主要组织相容性复合物(MHCⅡ)激活因子(CⅡTA)的反义cDNA对细胞表面MHCⅡ类分子表达的抑制.方法克隆3条CⅡTA反义片段(arⅡ1、arⅡ2、arⅡ3),并稳定转染Hela细胞.免疫组化、流式细胞术检测细胞核内CⅡTA蛋白及其调控的经典MHCⅡ(HLA-DR、-DP、-DQ)类抗原表达,RT-PCR法检测CⅡTA、经典MHCⅡ及恒定链的mRNA水平.结果三种反义片段中arⅡ2效果最佳.在重组人IFN-γ诱导下,arⅡ2阳性Hela细胞与正义链组比较,CⅡTA蛋白抑制率达87.23%, HLA-DR、-DP及-DQ抗原诱导型表达分别降低了79.21%、90.31%及48.30%;同时CⅡTA、经典的MHCⅡ及恒定链的mRNA含量明显减少(P<0.05).结论 CⅡTA反义片段抑制了自身mRNA含量,从而阻止其调控的MHCⅡ分子的表达,为预防移植物抗宿主病提供了一种新思路.

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