农杆菌介导的半夏凝集素基因(Pinellia Ternate Agglutinin Gene,pta)对小麦的遗传转化及鉴定

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lukexingmm
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以甘肃主要推广春小麦品种陇春22幼胚为转基因受体材料,建立了农杆菌介导的小麦遗传转化体系。以预培养4天的幼胚愈伤组织为受体,C58c1农杆菌菌株为供体,将含有半夏凝集素基因的重组质粒pBIpta转入了小麦,经G418 25 mg/L抗性筛选、PCR检测和荧光定量PCR检测共获得转基因植株3株,外源基因的插入拷贝数分别为2、1、3。同时对转基因小麦的T1代植株进行了PCR检测和抗虫性分析,表明半夏凝集素基因在转基因植株的后代中得到了遗传并有一定的抗蚜虫作用。 Agrobacterium tumefaciens-mediated wheat genetic transformation system was established to promote the immature embryos of Longchun 22, a spring wheat cultivar in Gansu, as a transgenic receptor material. Four days pre-cultured immature embryo callus as the receptor, C58c1 Agrobacterium strain as a donor, the recombinant plasmid pBIpta containing Pinellia ternata gene transferred to wheat, G418 25 mg / L resistance screening, PCR Three strains of transgenic plants were obtained by detection and real-time PCR, and the number of inserted foreign genes was 2, 1 and 3, respectively. At the same time, PCR analysis and insect resistance analysis of transgenic T1 generation plants showed that the PNA gene was inherited in the offspring of transgenic plants and had certain anti-aphid effect.
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