脂联素原核表达载体PQE30／ADPN的构建及其表达与纯化

来源 :西北药学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hezefgj

【摘要】

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目的构建大鼠全长脂联素（fAd）和球状域脂联素（gAd）重组表达载体PQE30／ADPN，并在大肠杆菌宿主系统中表达出脂联素蛋白，对表达产物进行纯化和鉴定。方法将纯化的脂联素克隆产物与原核

【作者】

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胡雅婷温俊平林丽香陈刚

【机构】

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福建医科大学省立临床医院内分泌科

【出处】

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西北药学杂志

【发表日期】

：

2009年6期

【关键词】

：

脂联素基因表达大肠杆菌纯化 Adiponectin gene expression Escherichia（E. ） coli purificat

【基金项目】

：

福建省科技厅青年人才项目基金资助（编号2008F3032）

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目的构建大鼠全长脂联素（fAd）和球状域脂联素（gAd）重组表达载体PQE30／ADPN，并在大肠杆菌宿主系统中表达出脂联素蛋白，对表达产物进行纯化和鉴定。方法将纯化的脂联素克隆产物与原核表达载体PQE30通过双酶切方法位点特异地连接在一起，再转化入大肠杆菌M15感受态细胞中，并用IPTG诱导表达，并通过亲和层析、去盐、去除内毒素等纯化蛋白。结果PCR获得长度分别为684bp（fAd）和402bp（gAd）的目的片段，经PQE30原核表达载体连接、筛选及序列分析后，证实所插入目的片段与GenBank中脂联

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