神经干细胞增殖能力的组织差异性研究

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目的 从胚胎大鼠海马和上丘脑区中分离、培养神经干细胞,并进行体外增殖能力的比较.方法 采用机械分离,无血清传代培养法从胚鼠海马和上丘脑获得神经干细胞.动态观察细胞生长情况,测定其体外生长曲线.使用免疫荧光法对两种来源的细胞克隆进行鉴定,激光共聚焦显微镜三维形态观察.使用扫描电镜观察神经干细胞克隆球的表面形态特征.将神经干细胞与Brdu共孵育,观察体外增殖情况.结果 海马源胚胎神经干细胞的体外生长情况与上丘源干细胞基本相同,但前者的增殖速度相对较慢.两种来源的干细胞克隆球具有相似的超微结构.在相差显微镜和激光共聚焦显微镜下,两种来源的神经干细胞形态相似.与Brdu共孵育后,上丘源神经干细胞的阳性率高于海马源干细胞.从细胞生长曲线上可见两种来源的干细胞呈现了相同的增殖趋势,但生长曲线并不相同.从培养第8 d起,上丘源胚胎神经细胞的活细胞记数就高于海马源干细胞.结论 使用机械分离、无血清培养的方法可以获得胚胎海马源与上丘源神经干细胞,两者具有相似的形态结构,但上丘来源的神经干细胞增殖速度高于海马来源的神经干细胞。

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