【摘 要】
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目的探讨MEX3A基因沉默对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响,并验证MEX3A蛋白在人膀胱癌组织中的表达。方法选取8例病理诊断证实为膀胱癌患者的癌组织和癌周组织标本,其中男性5例,
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81371552)
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目的探讨MEX3A基因沉默对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响,并验证MEX3A蛋白在人膀胱癌组织中的表达。方法选取8例病理诊断证实为膀胱癌患者的癌组织和癌周组织标本,其中男性5例,女性3例;年龄50~84岁,平均年龄63.4岁。实验组应用MEX3A-shRNA慢病毒颗粒转染5637膀胱癌细胞株,对照组采用阴性对照慢病毒转染。实时定量聚合酶链反应(PCR)检测MEX3A基因敲减效率,使用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,Caspase3/7法检测细胞凋亡。应用免疫组织化学染色检测膀胱癌及癌周组织细胞中MEX3A蛋白表达量。结果实时荧光定量PCR检测经shRNA慢病毒感染两组目的基因mRNA水平的表达丰度,实验组为(0.26±0.05),对照组为(1.00±0.05);两组比较,MEX3A基因在实验组5637膀胱癌细胞中的mRNA水平的表达量受到抑制(t=17.7,P<0.05)。实验组与对照组相比,细胞增殖明显受到抑制(P<0.05),细胞凋亡显著增加(P<0.05)。在400倍光学显微镜下观察,棕黄色颗粒为人MEX3A蛋白与兔MEX3A抗体反应后染色所致,表示有MEX3A蛋白表达;在癌组织中较多,着色较深,癌周组织中较少,着色较浅。MEX3A蛋白在癌及癌周组织总的表达量分别为(7.33±2.73)分、(4.42±1.98)分,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);癌组织中的表达量约是癌周组织中的1.66倍。结论MEX3A基因可以促进膀胱癌细胞增殖,并抑制其凋亡;MEX3A蛋白在膀胱癌组织中呈现高表达。
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