利用同源重组技术敲除金黄色葡萄球菌临床分离株sarA基因

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目的:利用同源重组技术敲除金黄色葡萄球菌临床分离株sarA基因。方法:构建含有Em抗性基因(ermB)和sarA基因上、下游同源DNA片段的pBT2-ΔsarA质粒,将pBT2-ΔsarA质粒电转入金黄色葡萄球菌RN4220中,再把pBT2-ΔsarA质粒转入金黄色葡萄球菌30临床分离株中,把含重组质粒的金黄色葡萄球菌30临床分离株在42℃条件下振摇培养,筛选金黄色葡萄球菌30菌株的sarA基因缺失可疑突变株(SA30-ΔarlS);对重组到SA30染色体基因组的相应序列进行PCR扩增及DNA测序。结果:
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