【摘 要】
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目的 观察Cdx2小分子干扰RNA (Cdx2-siRNA)对人胃癌MGC-803细胞增殖及凋亡的影响.方法 设计合成针对Cdx2基因的siRNA寡核苷酸以及阴性对照siRNA.将人胃癌MGC -803细胞接种于
【机 构】
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广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科
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目的 观察Cdx2小分子干扰RNA (Cdx2-siRNA)对人胃癌MGC-803细胞增殖及凋亡的影响.方法 设计合成针对Cdx2基因的siRNA寡核苷酸以及阴性对照siRNA.将人胃癌MGC -803细胞接种于培养板中,分为3组,正常对照组不作任何处理,Cdx2-siRNA组和阴性对照组分别用LipofectamineTM 2000将Cdx2-siRNA或阴性对照siRNA转染进细胞内.应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测转染24h时胃癌MGC-803细胞中Cdx2 mRNA和蛋白的表达,应用噻唑蓝(MTT)比色法检测24、36、48、60、72 h的细胞活力,应用克隆形成实验检测转染7d时MGC-803细胞增殖的变化,应用流式细胞仪检测转染24h时MGC-803细胞周期和细胞凋亡的变化.结果 Cdx2-siRNA或阴性对照siRNA成功转染进胃癌MGC-803细胞内；Cdx2-siRNA组Cdx2 mRNA和蛋白的表达量分别为(0.07±0.01)和(0.15±0.02),明显低于阴性对照组和正常对照组(P＜0.05)；Cdx2-siRNA组细胞活力和增殖能力下降,24、36、48、60、72h的吸光度值分别为(0.125±0.003)、(0.193±0.005)、(0.223±0.005)、(0.267±0.003)、(0.315±0.006),克隆形成数为(51.4±3.2),均明显低于阴性对照组和正常对照组(P＜0.05)；而且,Cdx2-siRNA组细胞凋亡率为(12.5±0.6)％,G0/G1期比例为(73.1±7.8)％,明显高于阴性对照组和正常对照组(P＜0.05)；阴性对照组和正常对照组比较,上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Cdx2 -siRNA可抑制人胃癌细胞的活力和增殖能力,其机制与诱导细胞凋亡、使细胞周期停滞有关.
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