【摘 要】
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目的: 对人含前导肽的神经生长因子(β-NGF)基因序列进行体外扩增、克隆及分析鉴定,为其在真核细胞中表达并获得具有神经生长因子活性的蛋白及临床应用打下基础.方法:用一对
【机 构】
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中国医科大学肿瘤研究所分子肿瘤研究室
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)
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目的: 对人含前导肽的神经生长因子(β-NGF)基因序列进行体外扩增、克隆及分析鉴定,为其在真核细胞中表达并获得具有神经生长因子活性的蛋白及临床应用打下基础.方法:用一对特异引物,采用PCR技术,从人胎盘DNA基因组中扩增出含前导肽及信号肽的β-NGF基因序列;用A-T克隆法,与pGEM-T载体连接,经筛选得到重组质粒pGEM-Tβ-NGF,用酶切、PCR法及序列分析进行鉴定.结果:1.2%的琼脂糖凝胶电泳显示在预期位置出现阳性条带.结论:重组质粒pGEM-Tβ-NGF成功,克隆基因序列正确,此方法各环节
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