目的:研究运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术抑制NF-κB/p65基因的表达对人肺腺癌细胞株A5492细胞增殖、周期及凋亡的影响,探讨NF-κB/p65基因在肺腺癌发生发展中的作用。方法:利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将人NF-κB/p65的小干扰RNA转染入肺腺癌细胞株A549中。运用real time-PCR和Western blot技术检测A549细胞内NF-κB/p65、增殖相关基因Cyclin D1和凋亡相关基因Bcl-2、Bax的mRNA的转录水平和蛋白的表达情况,MTT法检测细胞的增殖活力,显微镜下观察细胞的生长情况。结果:NF-κB/p65 siRNA能有效地抑制A549细胞中NF-κB/p65基因在mRNA水平上的表达(P<0.001),同时下调Cyclin D1和Bcl-2的表达(均P<0.01)。上调Bax表达(P<0.001);蛋白表达也具同样趋势。MTT实验证明p65 siRNA转染组中细胞增殖减慢;显微镜镜下观察显示,细胞生长减慢,凋亡形态改变明显。结论:体外实验初步证明NF-κB/p65基因在肺腺癌细胞株A549增殖分化与凋亡方面扮演重要角色,通过沉默其表达可抑制肺腺癌细胞株A549增殖并诱导其凋亡。进一步证实NF-κB/p65对Cyclin D1、Bcl-2、Bax具有调控作用,他们共同参与了肺腺癌的发生发展过程。