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人巨细胞病毒Han株US12基因缺失株的构建及其在人胚肺成纤维细胞中的复制

来源 :中国医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lishao_minlimin

【摘 要】

：

目的构建人巨细胞病毒（HCMV）Han株US12基因缺失的BAC毒株，研究US12产物对HCMVHan株在人胚肺成纤维细胞（HELF）中复制的影响。方法以侧翼含有US12基因同源序列的PCR引物扩增卡那霉素

【作 者】

：

卢颖 马艳萍 柳中洋 王鸿雁 齐莹 韩丽英 高爽 郑博 刘畅 

【机 构】

：

中国医科大学附属盛京医院病毒研究室,锦州医科大学基础医学院病原生物学教研室,沈阳市妇婴医院临床实验室,沈阳市妇婴医院儿科

【出 处】

：

中国医科大学学报

【发表日期】

：

2017年6期

【关键词】

：

巨细胞病毒 US12 细菌人工染色体 生长曲线 cytomegalovirus US12 bacterial artificial chromosome 

【基金项目】

：

国家自然科学基金（30672248,81371788）,盛京医院自由研究者项目

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目的构建人巨细胞病毒（HCMV）Han株US12基因缺失的BAC毒株，研究US12产物对HCMVHan株在人胚肺成纤维细胞（HELF）中复制的影响。方法以侧翼含有US12基因同源序列的PCR引物扩增卡那霉素抗性基因，电转至含有Han株BAC质粒的大肠杆菌DY380-Han-wt-BAC，PCR及DNA测序验证US12缺失的病毒序列。将缺失突变质粒Han-ΔUS12-BAC-P电转至HELF，获得感染性病毒颗粒Han-ΔUS12-BAC。以MOI为0.1的Han-ΔUS12-BAC毒株及Han-wt-BAC

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