【摘 要】
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目的 克隆与人血脑屏障通透性相关基因Caveolin-1，并在大肠埃希菌中表达，最后进行蛋白纯化、鉴定。方法 根据基因库中收录的Caveolin-1基因序列，设计其上下游引物，经过PCR反应合
【机 构】
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广州中医药大学金沙洲医院重症医学部
【基金项目】
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广东省中医药局科研项目(20161048)
论文部分内容阅读
目的 克隆与人血脑屏障通透性相关基因Caveolin-1，并在大肠埃希菌中表达，最后进行蛋白纯化、鉴定。方法 根据基因库中收录的Caveolin-1基因序列，设计其上下游引物，经过PCR反应合成Caveolin-1双链，然后与pET28a（＋）载体重组，筛选阳性克隆并对DNA序列分析鉴定。将已构建好的重组质粒pET28a-Caveolin-1转入化大肠埃希菌BL21（DE3），异丙基硫代半乳糖苷诱导融合蛋白表达，表达产物经镍离子亲和层析（Ni^2＋-NTA）纯化，SDS-PAGE检测和Western bl
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